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改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA

蔡翠霞;肖维威;康文杰;周琳华;吴永彬;郑远金;马文丽;   

  1. 南方医科大学基因工程研究所;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家公益性行业科研专项(200910265);;

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。

关键词: Chelex-100法, CTAB法, DNA提取, PCR