利用农杆菌侵染新技术在豌豆中瞬时表达ha FGF

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (10): 71-75.

利用农杆菌侵染新技术在豌豆中瞬时表达ha FGF

杨丽萍,金太成,周晓馥

（吉林师范大学生命科学学院，四平 136000）

收稿日期:2013-08-05 修回日期:2013-10-15 出版日期:2013-10-14 发布日期:2013-10-15
作者简介:杨丽萍，博士，讲师，研究方向：植物生物反应器；E-mail ：yangliping781124@163.com
基金资助:
国家自然科学基金项目（31070224）

Transient Expression of ha FGF in Pea Plants by New Agroinoculation Biotechnology

Yang Liping, Jin Taicheng, Zhou Xiaofu

The School of Life Science，Jilin Normal University，Siping 136000

Received:2013-08-05 Revised:2013-10-15 Published:2013-10-14 Online:2013-10-15

摘要/Abstract

摘要：

采用一种操作简单的侵染方法，通过豌豆种子吸收携带病毒载体PEBV 的农杆菌菌液进行ha FGF 蛋白的表达，并采用半定量RT-PCR 、Western blotting 和考马斯亮蓝法对蛋白表达的结果进行定量分析。结果表明，利用来源于PEBV 的病毒载体在豌豆（Pisum sativum L.）中成功表达了GFP 和ha FGF 蛋白，对菌液浓度等条件的优化显著提高了GFP 的表达效率，植物中药用蛋白ha FGF 的表达水平占总可溶性蛋白的2.6% 。该瞬时表达体系具有独特优势，如简便、高效、表达稳定，在生产药用蛋白方面具有广阔的应用前景。

关键词: 人酸性成纤维细胞生长因子, 种子吸收法, 豌豆早褐病毒, 绿色荧光蛋白

Abstract:

The paper described a simple system to product ha FGF protein in pea plants by seed absorbing the Agrobacterium suspension containing PEBV-based vectors, and the expression results was detected by semi-quantitative RT-PCR, Western blotting, and Coomassie brilliant blue method. It has been shown that GFP and ha FGF protein were successfully expressed in pea（Pisum sativum L.）plants. The optimization of Agrobacterium cell density dramatically improved expression efficiency of GFP protein. The amount of recombinant pharmaceutical ha FGF in plants reached up to 2.6% of the total soluble proteins. The new system has the special advantages as easiest way, high efficiency, stable expression, and has the wide application in production of pharmaceutical proteins in the future.

Key words: Human acidic fibroblast growth factor（ha FGF）, Seed absorption system, Pea early browning virus（PEBV）, GFP

杨丽萍,金太成,周晓馥. 利用农杆菌侵染新技术在豌豆中瞬时表达ha FGF[J]. 生物技术通报, 2013, 0(10): 71-75.

Yang Liping Jin Taicheng Zhou Xiaofu. Transient Expression of ha FGF in Pea Plants by New Agroinoculation Biotechnology[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(10): 71-75.

[1]	王欢禹, 常昊宛, 章崇祺, 金卫林, 魏芳. 五种检测嵌合抗原受体表达方法的比较[J]. 生物技术通报, 2021, 37(12): 265-273.
[2]	王彩霞, 杜方原, 林祥梅, GrzegorzWozniakowski, 王勤, 冯春燕, 吴绍强. 稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白的Vero细胞系的建立[J]. 生物技术通报, 2020, 36(5): 139-144.
[3]	赵志文, 李艳娇, 户勋, 范晓静, 卓涛, 邹华松. 用于植物病原细菌标记的pBB-GFP载体构建及应用[J]. 生物技术通报, 2018, 34(3): 136-141.
[4]	孙海烨, 张梁, 李由然, 顾正华, 丁重阳, 石贵阳. 利用增强型绿色荧光蛋白研究不同启动子在乳酸克鲁维酵母中的功能[J]. 生物技术通报, 2017, 33(6): 197-206.
[5]	陈楠, 于飞, 何艳柳, 卜宁. 一株水稻促生长内生真菌的绿色荧光蛋白基因标记与示踪[J]. 生物技术通报, 2017, 33(3): 100-105.
[6]	刘晓瑜, 马玉超. 生防链霉菌SSD49的绿色荧光蛋白标记及其在毛白杨组培苗中的定殖[J]. 生物技术通报, 2016, 32(9): 197-202.
[7]	王海涛, 金波, 李树伟. 新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达[J]. 生物技术通报, 2016, 32(5): 82-90.
[8]	周培杰,高维强,方煜翔. 一种嵌合型调控元件在肿瘤靶向基因治疗中的应用[J]. 生物技术通报, 2015, 31(10): 255-262.
[9]	朱守海, 王璐璐. 肠道病毒71型（EV71）荧光病毒的构建[J]. 生物技术通报, 2014, 0(7): 179-183.
[10]	谭亚清, 刘德虎. 人酸性成纤维细胞生长因子的研究进展[J]. 生物技术通报, 2013, 0(5): 22-27.
[11]	苏琰;黎华;刘知晓;张小蒙;朱雪;金赫日;陈建民;. 染色体重组对转基因大麦中gfp基因表达的作用[J]. , 2011, 0(11): 95-100.
[12]	赵淑玲;梁昌镛;李敏;王海花;张高瞻;. 美洲棉铃虫细胞中dsRNA介导的egfp基因沉默分析[J]. , 2011, 0(11): 130-133.
[13]	于长燕;郑秀;朱燕;孟庆艳;王梦晓;高强;. 肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达[J]. , 2011, 0(08): 203-207.
[14]	陈平;胡涛;薛敬礼;杜春燕;章金涛;朱奎成;金树兴;王纯耀;. 利用慢病毒载体快速建立表达外源基因的哺乳动物细胞系[J]. , 2011, 0(07): 210-213.
[15]	薛礼长;杨慧兰;. Xfect介导重组质粒pEGFP-C2/LAT-ORF3高效转染Vero细胞的方法及其条件的优化[J]. , 2011, 0(01): 197-201.