胱抑素C抗体制备及化学发光免疫检测方法的建立

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.1017-1084

生物技术通报 ›› 2018, Vol. 34 ›› Issue (8): 75-79.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.1017-1084

胱抑素C抗体制备及化学发光免疫检测方法的建立

王云龙^1,2,3, 徐瑞芳¹, 李玉林^2,3, 王继创^2,3, 程春杰³, 高玉红³

1. 郑州大学生命科学学院,郑州 450001;
2. 河南省生物工程技术研究中心,郑州 450001;
3. 生物标志物定量检测河南省工程实验室,郑州 450001

收稿日期:2017-12-18 出版日期:2018-08-26 发布日期:2018-09-04
作者简介:王云龙,男,教授,研究方向：生物化学与生物工程药物;E-mail：biowyl@126.com
基金资助:
河南省科技攻关项目（152102310008）

Antibodies Preparation and the Establishment of Chemiluminescence Immunoassay Detection Method for Cystain C Polypeptide

WANG Yun-long^1,2,3, XU Rui-fang¹, LI Yu-lin^2,3, WANG Ji-chuang^2,3, CHENG Chun-jie³, GAO Yu-hong³

1. School of Life Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001;
2. Henan Bioengineering Technology Research Center,Zhengzhou 450001;
3. Henan Engineering Laboratory for Biomarker Quantitative Detection,Zhengzhou 450001

Received:2017-12-18 Published:2018-08-26 Online:2018-09-04

摘要/Abstract

摘要： 制备胱抑素C的单克隆抗体并建立可用于肾损伤早期诊断的化学发光检测方法。合成胱抑素C多肽制备单抗隆抗体,用竞争抑制法筛选优化配对抗体并建立化学发光胱抑素C检测方法。获得胱抑素C单抗细胞共39株,经筛选确定出可配对抗体,通过线性范围、最低检测限、精密性、准确度等分析性能评价,建立了线性范围为50-20 000 ng/mL、最低检测限为3 ng/mL的化学发光胱抑素C检测方法。成功制备胱抑素C配对抗体,并以此为基础建立了化学发光检测方法,为早期肾损伤提供了一种新检测技术和方法。

关键词: 胱抑素C多肽, 抗体配对, 化学发光

Abstract: The objective of this work is to prepare cystain C antibody and establish the chemiluminescence detection method for the early diagnosis of renal damnification. Cystatin C monoclonal antibody was prepared through chemical synthesis of cystain C polypeptide,then competitive inhibition assay was used for preliminary screening of paired antibody,and chemiluminescence immunoassay detection method of cystain C was established. Totally,39 strains of cystatin C monoclonal antibody cells were obtained,and paired antibody was screened. By analyzing the linear range,minimum detection limit,precision,accuracy and other performance evaluation analysis,chemical luminescence detection method for detecting cystatin C was established,with linear range of 50--20 000 ng/mL and the minimum detection limit of 3 ng/mL. Conclusively,cystatin C paired antibody was prepared and chemiluminescence detection method was established successfully,which provides a new detection technique and method for early renal damnification.

Key words: cystatin C polypeptide, antibody paired, chemiluminescence

王云龙, 徐瑞芳, 李玉林, 王继创, 程春杰, 高玉红. 胱抑素C抗体制备及化学发光免疫检测方法的建立[J]. 生物技术通报, 2018, 34(8): 75-79.

WANG Yun-long, XU Rui-fang, LI Yu-lin, WANG Ji-chuang, CHENG Chun-jie, GAO Yu-hong. Antibodies Preparation and the Establishment of Chemiluminescence Immunoassay Detection Method for Cystain C Polypeptide[J]. Biotechnology Bulletin, 2018, 34(8): 75-79.

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胱抑素C抗体制备及化学发光免疫检测方法的建立

Antibodies Preparation and the Establishment of Chemiluminescence Immunoassay Detection Method for Cystain C Polypeptide

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