中间型高温放线菌特异PCR 快速鉴别方法的应用

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (7): 60-63.

中间型高温放线菌特异PCR 快速鉴别方法的应用

张明娟¹, 姚粟¹, 李辉¹, 刘洋¹, 信春晖², 许玲², 程池¹

1.中国食品发酵工业研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心, 北京 100015；
2.山东扳倒井股份有限公司, 高青 256300

收稿日期:2014-01-03 出版日期:2014-07-15 发布日期:2014-07-16
作者简介:张明娟, 女, 研究方向：酿酒微生物；E-mail：zhangming.juan@163.com
基金资助:
国家科技支撑计划课题（2012BAK17B11）

Establishment and Application of a Specific PCR Assay for Rapid Identifying Thermoactinomyces intermedius

Zhang Mingjuan¹, Yao Su¹, Li Hui¹, Liu Yang¹, Xin Chunhui², Xu Ling², Cheng Chi¹

1. Chinese Food Fermentation Industry Research Institute Chinese industrial culture collection center, Beijing 100015；
2. Shandong Bandaojing Limited by Share Ltd, Gaoqing 256300

Received:2014-01-03 Published:2014-07-15 Online:2014-07-16

摘要/Abstract

摘要： 根据中间型高温放线菌的gyrB基因设计了中间型高温放线菌的特异性引物, 建立了快速筛选中间型高温放线菌菌种的特异PCR方法, 并将其应用于芝麻香型白酒高温大曲中的中间型高温放线菌筛选。结果表明, 所设计的特异性引物对中间型高温放线菌具有较高的特异性, 可以快速鉴别中间型高温放线菌菌种, 并成功从芝麻香型白酒高温大曲中快速筛选获得中间型高温放线菌, 与传统的菌种鉴定方法相比, 具有高效、灵敏、便捷及成本低廉等显著优点。

关键词: 特异PCR, 中间型高温放线菌, 快速鉴别

Abstract: This study establishs a rapid specific PCR assay to screen Thermoactinomyces intermedius strains and screens Thermoactino-myces intermedius strains from high-temperature daqu of sesame flavor liquor by the specific PCR assay. Experimental results show that the designed specific primers are specific for Thermoactinomyces intermedius, it is suitable for screening rapidly Thermoactinomyces intermedius strains. The specific PCR can save a lot of time and costs compared with the traditional identifying methods.

Key words: Specific PCR, Thermoactinomyces intermedius, Rapid identifying

张明娟, 姚粟, 李辉, 刘洋, 信春晖, 许玲, 程池. 中间型高温放线菌特异PCR 快速鉴别方法的应用[J]. 生物技术通报, 2014, 0(7): 60-63.

Zhang Mingjuan, Yao Su, Li Hui, Liu Yang, Xin Chunhui, Xu Ling, Cheng Chi. Establishment and Application of a Specific PCR Assay for Rapid Identifying Thermoactinomyces intermedius[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(7): 60-63.

参考文献

[1] Yoon JH, Park YH. Phylogenetic analysis of the genus Thermoactin-omyces based on 16S rDNA sequences[J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2000, 50：1081-1086.
[2] Paul De Vos, Garrity GM, Jones D, et al. Bergey’s manual of systematic bacteriology second edition volume 3 ［M] . London：2009, 4：2574-2585.
[3] Yao S, Liu Y, Zhang MJ, et al. Thermoactinomyces daqus sp. nov., a thermophilic bacterium isolated from high temperature Daqu[J]. International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology, 2013 . doi：10.1099/ijs.0.055509-0.
[4] Muranova TA, Ruzheinikov SN, Sedelnikova SE, et al. Crystallization and preliminary X-ray analysis of substrate complexes of leucine dehydrogenase from thermoactinomyces intermedius[J]. Biological Crystallography, 2002, 58：1059-1062.
[5] Hanson RL, Howell JM, LaPorte TL, et al. Synthesis of allysine ethy-lene acetal using phenylalanine dehydrogenase from Thermoactino-myces intermedius[J]. Enzyme and Microbial Technology, 2000, 26：348-358.
[6] 姚粟, 葛媛媛, 李辉, 等. 利用非培养技术研究芝麻香型白酒高温大曲的细菌群落多样性[J]. 食品发酵与工业, 2012, 38（6）：1-6.
[7] 刘洋, 赵婷, 姚粟, 等. 一株芝麻香型白酒高温大曲嗜热放线菌的分离与鉴定[J]. 生物技术通报, 2012（10）：210-216.
[8] 葛媛媛, 姚粟, 刘洋, 等. 芝麻香型白酒高温大曲嗜热细菌群落研究[J]. 食品发酵与工业, 2012, 38（11）：16-19.
[9] 安然, 易图永, 肖启明, 等. gyrB基因在细菌分类和检测中的应用[J]. 江西农业学报　2010, 22（4）：18-20.
[10] 沈萍. 微生物学［M] . 北京：高等教育出版社, 2006：314-317.
[11] 赵潞, 张列兵, 张世湘, 等. 利用种特异性PCR快速鉴定新疆酸马奶优势菌群[J]. 中国乳品工业, 2010, 38（1）：12-14.
[12] 刘勇, 李辉, 李金霞, 等. 特异PCR方法对枯草芽孢杆菌群的鉴定区分[J]. 饲料工业, 2010, 31（4）：52-54.
[13] 商蓓, 付洁, 罗泽青, 等. 苹果黑星病菌的分子检测[J]. 西北农林科技大学学报, 2010, 38（8）：104-110.