类球红菌自诱导物合成酶基因cerI的克隆及其原核表达

类球红菌自诱导物合成酶基因cerI的克隆及其原核表达

苗艳;叶姜瑜;习劲;廖强;

西南大学生命科学学院;三峡库区生态环境教育部重点实验室重庆大学城市建设与环境工程学院;重庆大学动力学院工程热物理研究所;

出版日期:2009-06-26 发布日期:2009-06-26
基金资助:
国家自然科学基金重点课题(90510020)

Published:2009-06-26 Online:2009-06-26

摘要/Abstract

摘要： 根据类球红菌(Rhodobacter sphaeroides2.4.1)自诱导物合成酶基因cerI的序列,设计并合成了1对特异性引物,在引物的5′和3′分别加入含有HindIII和XhoI限制性酶切位点的序列,以类球红细菌Rhodobactersphaeroides基因组为模板扩增了cerI基因序列。将PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α。鉴定成功获得目的片段,经HindIII和XhoI双酶切后与载体pET-28a(+)连接,构建原核表达质粒pET-28a(+)-cerI,并将其转化宿主菌BL21(DE3),用IPTG诱导其表达。SDS-PAGE分析表明,重组载体pET-28a(+)-cerI可成功地在大肠杆菌中表达cerI蛋白。

关键词: 类球红菌, cerI基因, 克隆, 原核表达

苗艳;叶姜瑜;习劲;廖强;. 类球红菌自诱导物合成酶基因cerI的克隆及其原核表达[J]. .

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