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利用重叠PCR技术对OsAMT1.2进行定点突变

李宝珍;李素梅;施卫明;苏彦华;   

  1. 中国科学院南京土壤研究所土壤与农业可持续发展国家重点实验室;
  • 出版日期:2009-09-26 发布日期:2009-09-26
  • 基金资助:
    中国博士后科学基金(20070421031);; 国家“973”计划项目(2007CB109303);; 中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-YW-N-002)

  • Published:2009-09-26 Online:2009-09-26

摘要: 铵是植物吸收利用的主要氮源之一,而铵转运蛋白对铵的吸收、转运和代谢方面有重要的作用。为了深入研究水稻铵转运蛋白的结构功能特性,利用重叠PCR技术对OsAMT1.2蛋白质序列中保守的253 aa和257 aa的苯丙氨酸(F)和丝氨酸(S)分别突变为丙氨酸,成功获得了相应的2个点突变基因。因此,重叠PCR技术是一种简单有效的进行体外基因重组和突变的方法,对于研究高等植物功能基因的结构功能特性具有重要的意义。

关键词: 水稻, 铵转运蛋白, OsAMT1.2, 点突变, 重叠PCR