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基因预测与PCR技术相结合从cDNA文库中获取表达基因的研究

谢小燕;谭有将;李景全;陈芳;高剑峰;   

  1. 石河子大学生命科学学院;
  • 出版日期:2010-09-26 发布日期:2010-09-26
  • 基金资助:
    中国美利奴绵羊MHC区段基因组成与结构研究项目(国际合作项目,2006DFB33750)

  • Published:2010-09-26 Online:2010-09-26

摘要: 应用计算机工具、GenScan软件预测中国美利奴绵羊MHC Class I区段的BAC文库中453oⅡ克隆的基因数目、特性及结构,建立一种可以从cDNA文库中简便有效获取表达基因的技术方法。选取4个预测基因作研究对象设计引物,应用PCR技术,对已构建好的cDNA文库进行PCR扩增,回收"目的基因"片段并连接pGEM-T载体,转DH5α大肠杆菌中扩增后测序。琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,cDNA文库中有目的条带,测序结果与GenBank进行Blast分析,分析结果表明这些基因与羊的基因均具有99%以上的相似性。因此应用基因预测分析与PCR结合技术可简便迅速的从cDNA文库中获取表达基因。

关键词: 基因预测, PCR, cDNA文库