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稳定高表达人ERP57基因A549细胞株的建立及其对CRT表达的影响

杨建林;韩钰;王艳林;张伟;   

  1. 三峡大学分子生物学研究所;
  • 出版日期:2010-10-26 发布日期:2010-10-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(30973445);; 校级青年科学基金(KJ2008A039)

  • Published:2010-10-26 Online:2010-10-26

摘要: 建立稳定高表达人ERP57蛋白的A549细胞株,并观察对CRT表达的影响。采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57真核表达质粒(pcDNA3.1(+)/ERP57)脂质体转染A549细胞。经G418筛选,获得高表达人ERP57蛋白的A549细胞株。通过Western blotting检测细胞中ERP57及CRT蛋白表达情况。成功获得稳定高表达ERP57蛋白的人A549细胞株,CRT表达量无明显改变。成功获得稳定高表达ERP57蛋白的人A549细胞株,证实细胞中高表达ERP57对CRT表达量无明显影响。

关键词: ERP57, 钙网蛋白(CRT), 真核表达, A549细胞