]*>","")" /> 抗虫/耐草甘膦双价融合基因表达载体的构建及烟草转化

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抗虫/耐草甘膦双价融合基因表达载体的构建及烟草转化

祁伟彦;孙鹤;周妮;朱莉;郎志宏;黄大昉;   

  1. 中国农业科学院生物技术研究所;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30771383);;

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 随着植物基因工程的发展,将多个基因转化植株已成为研究的热点之一,利用连接肽进行多个基因融合的策略已引起广泛关注。利用连接多肽2A和LP4/2A分别将抗虫基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt)cry1Ah和耐草甘膦基因mG2-epsps连接起来,构建了4个融合基因表达载体pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH和两个单基因载体pSAh、pSmG2,其中pHAG、pHLAG是Bt cry1Ah基因在前,mG2-epsps基因在后,pGAH、pGLAH是mG2-epsps基因在前,Bt cry1Ah基因在后,分别用2A和LP4/2A作为连接肽,由CaMV35S启动子驱动。利用农杆菌介导法将6个植物表达载体转入烟草,得到再生植株529株。经PCR检测,有261株再生苗为阳性植株,转化率达到49.3%。获得的转基因烟草可用于分析连接肽2A和LP4/2A的剪切效率以及不同基因与连接肽连接位置差异对基因表达的影响。

关键词: cry1Ah, mG2-epsps, 2A, LP4, 转基因烟草