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菊花CmDFR与CmANS基因启动子序列克隆与瞬时表达分析

唐杏姣;韩科厅;胡可;孟丽;戴思兰;   

  1. 北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心;
  • 出版日期:2012-05-26 发布日期:2012-05-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(31071823,30671714)

  • Published:2012-05-26 Online:2012-05-26

摘要: DFR和ANS是花青素合成途径下游两个关键的结构基因,其不仅决定花青素苷最终结构及其呈色,还在花器官中特异性表达,研究其启动子区域对花色改良的分子育种具有重要参考价值。利用接头染色体步移法(genome walking),从菊花的叶片基因组DNA中克隆到了2个DFR基因同源序列CmDFR的启动子片段,1个ANS基因同源序列CmANS的启动子片段。生物信息学软件分析结果显示,这3个启动子片段除了含有多个TATA-box、CAAT-box等基本的启动子元件,还含有很多与MYB转录因子相结合的元件,以及G-box等参与光响应的顺式作用元件。利用双酶切方法,将克隆到的启动子片段替换载体pBI121上的35S启动子,将新构建的植物表达载体转入农杆菌中,采用叶盘法侵染菊花叶片和花瓣进行瞬时表达研究。结果表明,这3个启动子片段均具有驱动下游报告基因表达的功能。因此,可以开发成菊花分子育种的有效基因构件。

关键词: 菊花, 花青素途径, 启动子, 染色体步移, 瞬时表达