莱茵衣藻基因组文库的构建

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (4): 85-89.

莱茵衣藻基因组文库的构建

王潮岗¹, 陈爱娜¹, 胡章立¹, 于珊珊²

1. 深圳大学生命科学学院深圳市海洋生物资源与生态环境重点实验室，深圳 518060 ； 2. 深圳大学师范学院附属中学，深圳 518054

收稿日期:2012-10-12 修回日期:2013-04-22 出版日期:2013-04-22 发布日期:2013-04-22
作者简介:王潮岗，男，博士，助理研究员，研究方向：微藻基因工程；E-mail ：charlesw@szu.edu.cn
基金资助:
国家自然科学基金项目（31000162，31070323）

Construction of a Genomic DNA Library of Chlamydomonas reinhardtii

Wang Chaogang¹, Chen Aina¹, Hu Zhangli¹, Yu Shanshan²

1. Shenzhen Key Laboratory of Marine Biological Resources and Ecological Environment，College of Life Sciences，Shenzhen University， Shenzhen 518060 ；2. The High School Attached to Shenzhen University Normal College，Shenzhen 518054

Received:2012-10-12 Revised:2013-04-22 Published:2013-04-22 Online:2013-04-22

摘要/Abstract

摘要： 以莱茵衣藻CC-849 为材料，提取基因组DNA，利用BamH Ⅰ和Bgl Ⅱ对基因组DNA 进行酶解，获得了可用于构建基因组文库的6-12 kb 的基因组片段，并浓缩至200 ng/μL。该片段与λDNA 载体连接，经噬菌体蛋白包装、侵染大肠杆菌XL1- blue 后，获得了莱茵衣藻基因组文库。该文库的滴度为2.12×10⁵ pfu/mL，共有转化子4.26×10⁴ 个，插入片段的平均长度约为9 kb，扩增后基因组文库滴度为9.5×10⁶ pfu/mL。

关键词: 莱茵衣藻, 基因组文库, 噬菌体, ZAP 表达载体

Abstract: The genomic DNA isolated from Chlamydomonas reinhardtii CC-849 was digested with BamH I and Bgl II. The 6-12 kb genomic DNA fragments were recovered from agarose gel and concentrated to 200 ng/μL. Then they were inserted into λDNA ZAP expression vector, packed by packaging extracts of λ phage and transformed into Escherichia coli XL1-Blue. Finally, the genomic DNA library was obtained with an average insert size of 9 kb. Results showed that the titer of genomic library was 2.12×10⁵ pfu/mL and contained 4.26×10⁴ clones. After amplified, the titer of genomic library was up to 9.5×10⁶ pfu/mL.

Key words: Chlamydomonas reinhardtii, Genomic DNA library, λDNA, ZAP expression vector

王潮岗, 陈爱娜, 胡章立, 于珊珊. 莱茵衣藻基因组文库的构建 [J]. 生物技术通报, 2013, 0(4): 85-89.

Wang Chaogang, Chen Aina, Hu Zhangli, Yu Shanshan. Construction of a Genomic DNA Library of Chlamydomonas reinhardtii[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(4): 85-89.

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