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DNA测序中常见影响因素的研究

宋艳斌;马文丽;郑文岭   

  1. 南方医科大学分子生物学研究所,南方医科大学分子生物学研究所,广州军区肿瘤分子生物学研究所 广州510515
  • 出版日期:2005-02-26 发布日期:2005-02-26

  • Published:2005-02-26 Online:2005-02-26

摘要: 对测序中的模板、引物、测序反应条件及测序反应纯化方法和仪器操作等进行研究。结果显示测序模板的纯度影响测序的质量 ,浓度对测序的长度有影响。引物设计时除符合一般设计原则外 ,Tm值最好在5 0℃~ 6 0℃之间 ,且无成串的G、C。改变变性、退火、延伸的时间和温度对特殊DNA模板的序列测定有较好的效果。测序反应产物的纯化有几种方法 ,以 70 %乙醇沉淀法最经济、方便。因此模板的纯度和浓度对测序成功与否起决定作用。最佳反应条件可降低成本 ,提高测序成功率 ,乙醇沉淀法是首选的测序反应产物纯化方法。仪器操作熟练、正确与否也会影响测序结果。

关键词: DNA, 循环测序, 影响因素