新疆荒漠昆虫光滑鳖甲cDNA文库的构建及功能基因筛选

新疆荒漠昆虫光滑鳖甲cDNA文库的构建及功能基因筛选

杨长庚;张富春;马纪;

新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室乌鲁木齐830046,乌鲁木齐830046,乌鲁木齐830046

出版日期:2006-08-26 发布日期:2006-08-26
基金资助:
科技部重大基础研究前期研究专项(2003CCA01000);; 新疆生物资源基因工程重点实验室开放课题(XJDX0201-200403)

Published:2006-08-26 Online:2006-08-26

摘要/Abstract

摘要： 以过冬后早春的新疆荒漠拟步甲属昆虫光滑鳖甲(Anatolica Polita borealis)成虫为研究材料,应用SMARTTM cDNA Library Construction技术,通过总RNA提取,反转录合成cDNA,定向构建至噬菌体载体λTripEx2,经体外包装构建了光滑鳖甲的cDNA表达文库。测试结果表明库容量为2.2×106,重组率为84.8%。通过对cDNA文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析,获得28个光滑鳖甲表达序列标签(ESTs),包括17个EST(60.7%)与NCBI中已注册的已知功能基因相似性较高,另外的11个EST(39.3%)则没有发现与之相似的序列,推测可能是功能未知的新基因。同时,利用PCR扩增文库技术从cDNA文库中克隆获得了光滑鳖甲的抗冻蛋白基因,初步表明光滑鳖甲cDNA表达文库构建的成功,为深入研究新疆荒漠昆虫的抗冻机理及发现新的昆虫功能基因奠定了基础。

关键词: 光滑鳖甲, cDNA文库, 表达序列标签, 抗冻蛋白

杨长庚;张富春;马纪;. 新疆荒漠昆虫光滑鳖甲cDNA文库的构建及功能基因筛选[J]. .

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