]*>","")" /> 扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建

• 论文 • 上一篇    下一篇

扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建

王彩梅;蔡少丽;吴义真;林琳;   

  1. 福建师范大学生命科学学院,福建师范大学生命科学学院,福建师范大学生命科学学院,福建师范大学生命科学学院 福州350007,福州350007,福州350007,福州350007
  • 出版日期:2007-08-26 发布日期:2007-08-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金资助项目(No.30270033);; 福建省自然科学基金资助项目(No.B0120001和C0410009);; 福建省工业微生物研发平台建设(2006H0085)项目资助

  • Published:2007-08-26 Online:2007-08-26

摘要: 利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并将含突变基因的重组质粒pAO815-ep8-R182K在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明:叠加突变体表达蛋白PEL-ep8-R182K最适反应温度与野生型PEL、PEL-ep8一致,均为40℃;热稳定性与野生型相似,比PEL-ep8降低2.25℃。但是,在比活上,PEL-ep8-R182K与PEL-ep8、野生型PEL相比,其比酶活分别提高了14.03%和3.86%。

关键词: 扩展青霉脂肪酶, 叠加突变, 最适温度, 热稳定性