rPA(K)的原核表达及其产物的初步纯化

rPA(K)的原核表达及其产物的初步纯化

罗惠霞;李敏;王玉炯;石晶;

宁夏大学生命科学学院重点实验室,宁夏大学生命科学学院重点实验室,宁夏大学生命科学学院重点实验室,宁夏大学生命科学学院重点实验室银川750021,银川750021,银川750021,银川750021

出版日期:2007-12-26 发布日期:2007-12-26
基金资助:
宁夏自然科学基金资助(项目号:NZ0505)

Published:2007-12-26 Online:2007-12-26

摘要/Abstract

摘要： rPA(K)是经过缺失/定点突变技术所获得的t-PA突变体。本实验以IPTG诱导,实现了rPA(K)在原核系统中的表达。实验证明目的产物的表达形式为包涵体,且当以IPTG诱导3h时,表达量最高,为41%。此后对该表达产物进行了初步纯化,即通过对不同超声破碎次数,包涵体洗涤液(脲,Triton X-100,乙醇)的不同浓度对纯化的影响因素进行了摸索。结果表明,超声2次,2M脲,0.5%Triton X-100,20%乙醇对目的蛋白纯化的效果最好,从而为进一步的纯化和复性奠定基础。

罗惠霞;李敏;王玉炯;石晶;. rPA(K)的原核表达及其产物的初步纯化[J]. .

[1]	张春晨, 胡双艳, 阮海华. 人源溶菌酶在大肠杆菌中的表达与复性研究[J]. 生物技术通报, 2020, 36(3): 153-161.
[2]	安志远,苏建荣. 鲍曼不动杆菌外膜蛋白34的表达纯化及其生物活性分析[J]. 生物技术通报, 2017, 33(7): 185-194.
[3]	黄演婷, 卢雪梅, 杨小蓉, 金小宝, 朱家勇. 重组融合蛋白Trx-IFN-CSP复性工艺研究[J]. 生物技术通报, 2016, 32(6): 219-225.
[4]	李江峰,矫丽媛,赵晓妮,王继华,才蕾. 人C反应蛋白在不同原核表达载体及菌株中的表达及免疫反应性分析[J]. 生物技术通报, 2016, 32(3): 166-170.
[5]	李晶泉, 徐永平, 王熙涛, 李媛, 王丽丽, 李晓宇. 抗金黄色葡萄球菌单链抗体（scFv）的原核表达及蛋白纯化[J]. 生物技术通报, 2016, 32(11): 194-201.
[6]	翟晓鑫, 张秀娟, 杨杰, 高凤山. 大肠杆菌表达托佩克猪SLA-1胞外区的研究[J]. 生物技术通报, 2015, 31(3): 135-139.
[7]	张西轩, 李晔, 张振奇, 董世瑞, 赵培, 阮海华. 一种从大肠杆菌包涵体中分离纯化GST-TRAF6融合蛋白的方法[J]. 生物技术通报, 2014, 0(8): 182-188.
[8]	\|相兴伟,周宇芳. 昆虫包涵体衍生型病毒经口感染相关蛋白的研究进展[J]. 生物技术通报, 2014, 0(11): 40-47.
[9]	李向茸, 冯若飞, 谢晶莹, 田伟, 杨妍梅, 王丹, 马忠仁. 人血白蛋白的原核表达及应用[J]. 生物技术通报, 2013, 0(11): 130-135.
[10]	刘大和;张允;郭雄军;郭平川;Sorajo Umar;李锦秀;陈劲春;. 重组人脱氧核糖核酸酶Ⅰ的复性及活性鉴定[J]. , 2012, 0(09): 155-159.
[11]	徐宁;陈志玲;. 烟草微丝结合蛋白Fimbrin-ABD1结构域的表达及纯化[J]. , 2011, 0(07): 73-76.
[12]	孙卫国;李邦印;张灵霞;李国利;熊志红;程小星;. pBV220/hIL-4优化表达及其包涵体复性研究[J]. , 2011, 0(05): 205-208.
[13]	贺文;赵雪彦;姚敏;史海水;许丽辉;刘昆;姜玲玲;. 大鼠D-双功能蛋白基因原核表达载体的构建及表达[J]. , 2011, 0(01): 139-142.
[14]	智庆文;苗爱玲;. TAT-hEGF融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效自我表达[J]. , 2010, 0(07): 89-91.
[15]	孔晨虹;夏立亮;徐顺利;于源华;蒋琴;杨佳新;. 重组蛋氨酸裂解酶的表达、复性及活性研究[J]. , 2010, 0(04): 189-193.

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