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马IgM、IgG单克隆抗体的研制与鉴定

姜焱;陈国强;王凯民;唐泰山;张常印;   

  1. 江苏出入境检验检疫局,江苏出入境检验检疫局,江苏出入境检验检疫局,江苏出入境检验检疫局,江苏出入境检验检疫局 南京210001,南京210001,南京210001,南京210001,南京210001
  • 出版日期:2008-04-26 发布日期:2008-04-26

  • Published:2008-04-26 Online:2008-04-26

摘要: 以马IgM、IgG作为免疫抗原,以此免疫BALB/c小鼠,并取其脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)方法筛选,结果获得了4株分泌抗马IgM和2株分泌抗IgG的单克隆抗体的杂交瘤细胞,特异性试验证明,4株IgM单抗有很好的特异性,仅与马的IgM特异反应,而不与IgG反应;这4株单抗分别命名为IgM4H、IgM6B、IgM8A和IgM12F。经鉴定,IgM4H、IgM6B、IgM12F株为IgG1亚类,IgM8A株为IgG2a亚类,杂交瘤细胞的平均染色体数目为99条。杂交瘤细胞培养上清液及小鼠腹水McAb的ELISA都具有较高的效价,该杂交瘤细胞连续培养20代后仍能稳定分泌抗体。2株IgG的单克隆抗体有很好的特异性,只与IgG反应,而不与IgM发生交叉反应。

关键词: 马IgM, IgG, ELISA, 单克隆抗体, 杂交瘤细胞株