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小桐子ISSR-PCR体系的优化

王桂娟;陈茂盛;向振勇;   

  1. 中国科学院西双版纳热带植物园,中国科学院西双版纳热带植物园,云南农业大学园林园艺学院 勐腊666303,勐腊666303,昆明650201
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26
  • 基金资助:
    中科院西双版纳热带植物园创新工程试点经费(0501073003)

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 采用正交试验设计方法,建立了小桐子ISSR-PCR反应体系和扩增程序。结果表明,在20μl反应体系中含有1×PCR缓冲液、200#mol/L dNTP、0.5μmol/L引物、2.0mmol/L MgCl2、0.5U Tag DNA聚合酶和90ng模板DNA最适用于小桐子ISSR-PCR扩增。适宜的扩增程序为94℃7min;94℃1min,44℃~56℃(退火温度随引物不同而定)45s,72℃1min,35个循环;72℃7min;4℃保存。

关键词: 小桐子, ISSR, 正交优化