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重组胰高糖素样肽-1融合蛋白的纯化及其活性测定

陈其亮;窦文芳;雷楗勇;王一君;张立操;张文婷;陈蕴;张莲芬;金坚;   

  1. 江南大学医药学院分子药理研究室;
  • 出版日期:2008-12-26 发布日期:2008-12-26
  • 基金资助:
    863探索类项目(2006AA10Z449);; 江苏省六大人才高峰计划

  • Published:2008-12-26 Online:2008-12-26

摘要: 主要探讨了发酵液中融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的分离纯化过程。发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析、凝胶过滤分离得高纯度的rh(GLP-1A2G)2-HSA。纯化样品经SDS-PAGE检测为单一条带,HPLC分析纯度达98%,125I标记后用TCA沉淀法测定放射性纯度达97%,符合药效学和药代动力学研究的需要,整个纯化过程回收率达到48.5%。通过细胞增殖实验表明纯化后的rh(GLP-1A2G)2-HSA具有类似GLP-1的促胰岛β细胞增殖活性,说明该分离过程保护了融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的生物活性。通过融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA的纯化方法,可获得高纯度的重组融合蛋白rh(GLP-1A2G)2-HSA,为进一步的药效学和药代动力学研究奠定了基础。

关键词: 胰高糖素样肽-1, 融合蛋白, 纯化, 活性测定