富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化

富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化

冯志国;陆婕;郎君;李燕娇;陈正望;

华中科技大学分子生物物理教育部重点实验室;信阳师范学院生命科学学院;

出版日期:2009-03-26 发布日期:2009-03-26
基金资助:
国家自然科学基金(30370647)

Published:2009-03-26 Online:2009-03-26

摘要/Abstract

摘要： 利用RT-PCR技术从果蝇总RNA中克隆出富甘氨酸果蝇抗菌肽基因,将该基因插入原核表达载体pET-32a(+)的Nde I和Xho I酶切位点之间,然后用重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)利用乳糖操纵子的葡萄糖效应IPTG诱导表达,经15%SDS-PAGE、Western blot分析,在大约8 kD处出现了含6×His标签的抗菌肽蛋白。再以Ni-N TA纯化树脂进行亲和层析、脱盐、冻干,成功制备了富甘氨酸果蝇抗菌肽蛋白。

关键词: 果蝇, 富甘氨酸抗菌肽, 直接表达, 纯化, 葡萄糖效应

冯志国;陆婕;郎君;李燕娇;陈正望;. 富甘氨酸果蝇抗菌肽在大肠杆菌中的直接表达和纯化[J]. .

[1]	孟国强, 管建文, 牛春梅, 周颖, 沈苏林, 韦有恒. RagA转基因果蝇的构建及功能研究[J]. 生物技术通报, 2023, 39(6): 171-180.
[2]	李文硕, 王林松, 杜桂彩, 郭群群, 张廷婷, 杨宏, 李荣贵. 一种松材线虫醛脱氢酶的基因克隆及其生化性质[J]. 生物技术通报, 2022, 38(9): 207-214.
[3]	覃雪晶, 王雨涵, 曹一博, 张凌云. 青杄PwHAP5基因原核表达及多克隆抗体制备[J]. 生物技术通报, 2022, 38(8): 142-149.
[4]	易芳, 来鹏程, 郑希鳌, 胡帅, 高燕丽. Kod DNA聚合酶的制备及纯化研究[J]. 生物技术通报, 2022, 38(5): 183-190.
[5]	王小琴, 黄银萍, 王蔚倩, 吴萍, 全舒. 含非天然氨基酸定点突变的MLL3_SET蛋白表达与纯化[J]. 生物技术通报, 2022, 38(3): 194-202.
[6]	张丰文, 周丽亚, 董超, 史延茂. 纳豆中抗氧化肽的分离纯化与活性研究[J]. 生物技术通报, 2022, 38(2): 158-165.
[7]	陈铎, 刘永哲. 新型冠状病毒核蛋白N端结构域的表达纯化以及晶体优化[J]. 生物技术通报, 2022, 38(12): 149-155.
[8]	曹汝菲, 李泽轩, 许欢, 张莎, 张敏敏, 戴枫, 段晓雷. 脆弱拟杆菌Pif1解旋酶的表达纯化与晶体生长[J]. 生物技术通报, 2021, 37(9): 180-190.
[9]	田嘉慧, 封佳丽, 卢俊桦, 毛林静, 胡著然, 王莹, 楚杰. 一色齿毛菌漆酶LacT-1的分离纯化与性质研究[J]. 生物技术通报, 2021, 37(8): 186-194.
[10]	张西西, 张怡青, 李玉林, 韩笑, 王国强, 王晓军, 王旭东, 王云龙. 新型冠状病毒（SARS-CoV-2）N蛋白C端重组蛋白的原核表达、纯化及应用[J]. 生物技术通报, 2021, 37(5): 92-97.
[11]	王志新, 鲁雷震, 周景波, 封成玲, 贾紫伟, 宁亚维, 贾英民. 抗真菌肽研究进展[J]. 生物技术通报, 2021, 37(3): 206-218.
[12]	唐禄, 董丽平, 尹茉莉, 刘磊, 董媛, 王会岩. 成纤维细胞生长因子20单克隆抗体的制备及鉴定[J]. 生物技术通报, 2021, 37(10): 179-185.
[13]	白谨铭, 赵子翔, 秦嘉晨, 刘鉴辉, 梁爱博. 烟草水提物对果蝇寿命及有关基因转录的影响[J]. 生物技术通报, 2020, 36(3): 162-167.
[14]	孟利, 杜彩萍. 大鼠His-Akt1重组蛋白的真核表达、蛋白纯化及活性鉴定[J]. 生物技术通报, 2020, 36(12): 98-103.
[15]	周阳, 王桃桃, 闫丹丹, 王莹莹, 施沁璇, 孙丽慧, 林锋. 类弹性蛋白作为功能纳米材料在生物工程领域研究及应用进展[J]. 生物技术通报, 2020, 36(11): 198-208.

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