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PCR方法筛选淡紫灰链霉菌海南变种基因组粘粒文库

田云龙;朱昌雄;蒋细良;郭萍;刘雪;   

  1. 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所;中国农业科学院植物保护研究所;
  • 出版日期:2009-11-26 发布日期:2009-11-26
  • 基金资助:
    国家“863”项目(2006AA10A209)

  • Published:2009-11-26 Online:2009-11-26

摘要: 以中生菌素产生菌淡紫灰链霉菌海南变种(Streptomyces lavendulae var.hainanensis)B-7菌株为材料,利用pOJ446作为载体构建了B-7菌株的基因组粘粒文库,文库效价达到4.21×106CFU/ml。随机挑取12个克隆提取质粒,经BamHI酶切电泳分析,插入片段大小约为30~40kb,符合建库要求的理论值。利用建立的基于96深孔板PCR技术的文库筛选改良方法,成功快速地筛选到含有目标基因片段的阳性菌株。

关键词: 中生菌素, 生物合成基因, 基因组, 粘粒文库, 筛选