]*>","")" /> 铅螯合物人工抗原的制备与鉴定

• 论文 • 上一篇    下一篇

铅螯合物人工抗原的制备与鉴定

刘功良;王菊芳;李志勇;梁世中;   

  1. 仲恺农业工程学院轻工食品学院;华南理工大学生物科学与工程学院;广东检验检疫技术中心;
  • 出版日期:2009-11-26 发布日期:2009-11-26
  • 基金资助:
    仲恺农业工程学院自然科学基金资助项目(2009G3091416);; 广东省科技计划项目(2003C20409);; 国家质检总局科技项目(2004IK062)

  • Published:2009-11-26 Online:2009-11-26

摘要: 以双功能螯合剂异硫氰酸苄基乙二胺四乙酸(ITCBE)螯合铅离子,制备得半抗原Pb-ITCBE,然后再分别与载体蛋白KLH或BSA偶联制备得免疫原Pb-ITCBE-KLH与包被抗原Pb-ITCBE-BSA,ITCBE-BSA。用二喹啉甲酸法测3种抗原的浓度,分析半抗原、抗原与载体蛋白的紫外吸收光谱,利用SDS-PAGE对3种抗原的分子量进行鉴定,用三硝基苯磺酸法检测3种抗原中的赖氨酸残基的ε-NH2被半抗原替换的程度,用石墨炉原子分光吸收法检测抗原中铅的含量。研究结果表明,免疫原与包被抗原制备成功,Pb-ITCBE-KLH、Pb-ITCBE-BSA、ITCBE-BSA的浓度依次为6.47±0.08mg/ml,6.68±0.06mg/ml,5.57±0.05mg/ml;抗原与载体蛋白的紫外吸收光谱的特征各不相同;SDS-PAGE的结果显示3种抗原的分子量均不同于各自的载体蛋白;抗原中载体蛋白ε-氨基的替换程度依次为1.86±0.74%、55.53±1.13%、54.19±1.34%;铅的含量依次为15.64±0.11μg/ml,17.33±0.15μg/ml,0μg/ml。

关键词: 铅, 双功能螯合剂, 抗原, 制备, 鉴定