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三角梅ISSR反应体系的建立和优化

李房英;黄彦晶;吴少华;赖钟雄;   

  1. 福建农林大学园林学院;福建农林大学园艺学院;
  • 出版日期:2010-07-26 发布日期:2010-07-26
  • 基金资助:
    国家支撑计划(子课题)菊花等闽台特色花卉新品种引进创新和离体保存研究(2007BAD07B03)

  • Published:2010-07-26 Online:2010-07-26

摘要: 对影响三角梅ISSR-PCR扩增反应的各个参数进行优化,建立适合三角梅的ISSR反应体系:PCR反应体积为20μL,其中10×buffer(含Mg2+)2.0μL,dNTP250μmol/L,Taq酶1.0U,引物0.3μmol/L,模板DNA20ng。扩增程序:94℃预变性5min;94℃变性1min,51.6℃退火1min,72℃延伸2min,34个循环;最后72℃延伸7min。该反应体系标记点位清晰、稳定、重复性好,适宜三角梅ISSR分析,为应用ISSR技术鉴定三角梅种质资源、分子标记辅助选择育种及其遗传多样性研究奠定了基础。

关键词: 三角梅, ISSR, 体系建立, 优化