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大薯ISSR-PCR反应体系的优化

程文杰;罗欣;周鑫;黄小龙;黄东益;   

  1. 海南大学农学院;
  • 出版日期:2010-09-26 发布日期:2010-09-26
  • 基金资助:
    海南省重点学科建设专项经费(xkxm0811-03);; 高等学校博士学科点专项科研基金(200805650004)

  • Published:2010-09-26 Online:2010-09-26

摘要: 以大薯为材料,通过试验优化了ISSR-PCR反应体系中的主要成分用量及浓度、退火温度对大薯ISSR扩增结果的影响。试验表明:在20μL的反应体系中,Mg2+的浓度为1.875 mmol/L,dNTPs浓度为0.500 mmol/L,引物的浓度为1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶的用量为1U,模板DNA的用量为60 ng,在48℃的退火温度下45个循环,能得到清晰、多态性高的ISSR带谱。

关键词: 大薯, ISSR, 反应体系, 优化