日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化

日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化

代小梅;程晓霞;曾会明;韩烈保;

北京林业大学草坪研究所;长江大学园艺园林学院;

出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
基金资助:
国家“863”计划(2006AA10Z132);; “十一五”国家科技支撑项目(2006BAD01A19,2006BAC18B04-1);; 北京市重点实验室和北京市重点学科专项

Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要/Abstract

摘要： 介绍了分别以日本结缕草根部、叶部、匍匐茎等为材料的总RNA提取的改良步骤,质量和浓度检测及其注意事项,并采用Promega公司的Poly ATract Systems Ⅲ(Z5300)试剂盒进行mRNA分离,尽管这一方法成熟可行,但仍存在洗脱体积较大,常需先沉淀浓缩后才能进行后续试验(如cDNA合成),在制备少量mRNA时回收率较低等问题。据此,对mRNA分离方法作了改良,介绍了mRNA分离的优化步骤,通过增加体系形成了一种更适合于日本结缕草mRNA分离的方法,从而为日本结缕草的分子生物学研究提供基础资料。结果证明所提取的总RNA和mRNA完整,质量较高,并应用到日本结缕草cD-NA文库的构建。

代小梅;程晓霞;曾会明;韩烈保;. 日本结缕草总RNA提取和mRNA分离方法的优化[J]. .

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