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木榄CaM基因的克隆及序列分析

庞俊峰;于卓;张占路;房永雨;唐益雄;吴燕民;   

  1. 内蒙古农业大学农学院;中国农业科学院生物技术研究所;深圳市农科集团公司;
  • 出版日期:2010-12-26 发布日期:2010-12-26
  • 基金资助:
    农业部转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08005-004B)

  • Published:2010-12-26 Online:2010-12-26

摘要: 以深圳红树自然保护区的木榄为材料,根据GenBank上已公布的钙调蛋白氨基酸保守区的碱基序列设计引物,RT-PCR扩增木榄CaM序列,获得cDNA全长735bp,命名为BgCaM(GenBank登录号:GU722140)。生物信息学分析表明,BgCaM与拟南芥、花生、大麦、榉木及甘薯等植物钙调蛋白氨基酸保守区具有较高同源性。BgCaM基因完整开放阅读框为450bp,编码149个氨基酸,预测蛋白等电点为4.11,分子量为16.8kD。分析基因序列和相应酶切位点,将扩增获得的BgCaM基因完整开放阅读框与中间表达载体相应酶切产物进行连接,构建植物表达载体pC13rd29A-BgCaM,为BgCaM功能分析和进一步利用奠定了基础,为植物转基因研究与应用又增添了一个新的基因源。

关键词: 木榄, 钙调蛋白, 基因克隆, 生物信息学, 载体构建