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东亚三角涡虫PSA蛋白的表达、鉴定及抑菌分析

刘斌;赵博生;   

  1. 山东理工大学生命科学学院发育与进化生物学实验室;
  • 出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
  • 基金资助:
    山东省自然科学基金项目(ZR2009DM029)

  • Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要: PCR扩增含酶切位点的DjPsa基因(ORF),构建了DjPsa基因的原核表达载体pET-28a(+)-DjPsa,转化入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE、Western blotting(His-Tag抗体)分析表达蛋白,抑菌试验检测其活性。结果表明,重组质粒在E.coli BL21(DE3)中以包涵体的形式高效表达,其蛋白的分子大小约为25 kD;Western blotting检测说明得到的蛋白为PSA重组蛋白;抑菌试验显示复性后的PSA具有较强的抑菌作用,为进一步研究它的功能、活性提供基础。

关键词: 东亚三角涡虫, DjPsa基因, 原核表达, Western blotting, 抑菌