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CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体的构建

阳辛凤;徐林;弓淑芳;郭安平;孔华;贺立卡;   

  1. 海南大学农学院;中国热带农业科学院热带生物技术研究所;中国热带农业科学院分析测试中心;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家“863”重点课题(2007AA021307);;

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 为了赋予工业酿酒酵母对淀粉和纤维素的降解活性,提高酿酒酵母对粗木薯粉进行酒精发酵时的酒精产率;另一方面,为了解决工业酿酒酵母不适于使用营养缺陷型筛选标记对转化子进行筛选的问题,以及避免引入抗药性标记基因带来的安全性问题,构建了以抗铜蛋白基因CUP1为筛选标记的酿酒酵母整合型多基因表达载体。以载体pYES2-PMF-rDNA为基础,以新的筛选标记基因CUP1替换原有的尿嘧啶Ura-基因,得到载体pYES2M。再顺序插入葡聚糖内切酶基因eg3、葡萄糖淀粉酶基因ga1和β-葡萄糖苷酶基因bgl1,构建得到以CUP1为筛选标记的酵母整合型三价表达载体pYES2M-eg3-ga1-bgl1,其中每个基因都具有独立而完整的表达盒,包括启动子、信号肽和终止子,从而实现多基因单表达载体一次转化。

关键词: 酿酒酵母, 载体, CUP1, 多基因转化