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牡丹ACC合成酶ACS1基因的克隆与原核表达

张超;张玉环;贾培义;董丽;   

  1. 北京林业大学园林学院国家花卉工程技术研究中心;
  • 出版日期:2011-10-26 发布日期:2011-10-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30972030)

  • Published:2011-10-26 Online:2011-10-26

摘要: 从牡丹‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘Luo Yang Hong’)花瓣中提取总RNA,根据GenBank上牡丹ACC合成酶基因PsACS的序列设计引物,通过RT-PCR获得牡丹PsACS1基因序列,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸。将PsACS1基因cDNA片段与pET28a(+)构建原核表达载体pET-ACS1,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)。0.4 mmol/LIPTG诱导3 h后,在预期的蛋白分子量55 kD处出现1条表达加强的蛋白条带。为进一步目的蛋白的纯化和鉴定提供试验基础。

关键词: 牡丹, ACC合成酶基因, 克隆, 原核表达