多肽抗体检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用

多肽抗体检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用

周晓明;傅海媛;黄亚娟;侯利平;孙云波;原剑;杨保安;郑俊杰;甄蓓;肖汉族;貌盼勇;魏开华;

安徽医科大学研究生学院;军事医学科学院放射与辐射医学研究所;北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室;湖南金健药业有限责任公司;解放军302医院;

出版日期:2012-05-26 发布日期:2012-05-26
基金资助:
卫生部传染病重大专项(2008ZX10002-016)

Published:2012-05-26 Online:2012-05-26

摘要/Abstract

摘要： 血清多肽是癌症诊断信息的重要来源,建立、优化了检测多肽标志物的直接ELISA法,并应用于肝癌血清中的多肽标志物的检测。制备及纯化针对多肽标志物Pep5的单克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,用其建立检测相应抗原的直接ELISA法。方法线性范围为1.5-20 ng/mL,检测限为1.24 ng/mL;标准品批内及批间CV分别小于3.66%及4.89%,血清样本批内及批间CV分别小于11.69%及18.18%;线性范围内(9、12和15 ng/mL)的回收率分别为98.98%,99.61%和101.58%。应用该方法共检测160例正常血清、104例肝硬化及156例肝癌患者血清,正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P<0.001),Pep5诊断肝癌的敏感性和特异性分别为80.8%和96.2%。同时检测94例HCC血清中的AFP和Pep5,AFP检出率为63.8%,Pep5检出率为90.4%,AFP联合Pep5检测时,能将HCC的检出率提高至94.7%。

关键词: 多肽抗体, ELISA, 肝癌, 早期诊断

周晓明;傅海媛;黄亚娟;侯利平;孙云波;原剑;杨保安;郑俊杰;甄蓓;肖汉族;貌盼勇;魏开华;. 多肽抗体检测原发性肝癌血清标志物ELISA方法的建立及应用[J]. .

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