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穿心莲ent-柯巴基焦磷酸合酶基因的克隆与生物信息学分析

姚攀;陈慧芝;李竹君;何瑞;杨锦芬;徐晖;   

  1. 广州中医药大学中药资源科学与工程研究中心;岭南中药资源教育部重点实验室广州中医药大学;
  • 出版日期:2012-10-26 发布日期:2012-10-26

  • Published:2012-10-26 Online:2012-10-26

摘要: 旨在克隆穿心莲CPS的编码基因,并进行序列分析。通过RT-PCR和cDNA末端快速扩增的技术从穿心莲叶片中获得目的基因;并利用生物信息学的方法对其编码蛋白进行功能分析。结果显示,获得了全长2 499 bp的cDNA序列,编码一个833 aa的蛋白。序列同源性比较表明,该蛋白与野甘草、咖啡等其他植物来源的CPS具有较高的同源性。保守功能结构域分析显示,该蛋白包含一个富含Asp残基的植物萜类合酶的共有保守功能域"DXDD",归属于萜类生物合成酶I类超级家族和顺式聚异戊二烯焦磷酸合酶超级家族。初步推测克隆得到了穿心莲CPS的编码基因(命名为ApCPS,GenBank登录号为JN216843.1)。

关键词: 穿心莲, 穿心莲内酯, ent-焦磷酸古巴酯合成酶(CPS), 基因克隆