产角质酶酵母菌的发现与鉴定及产酶条件的优化

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (5): 148-154.

产角质酶酵母菌的发现与鉴定及产酶条件的优化

冉琴琴^1，2 张效宁² 张文坤¹ 张学俊^1，2 张萌萌¹

(1.贵州大学贵州省发酵工程与生物制药重点实验室，贵阳 550025；2.贵州大学酿酒与食品工程学院，贵阳 550025)

收稿日期:2013-12-03 出版日期:2014-05-23 发布日期:2014-05-24
作者简介:冉琴琴，女，硕士研究生，研究方向：微生物学、天然产物化学；E-mail：rqq0913@163.com
基金资助:
贵州省科技攻关项目(2000)1163号，黔科合SY字[2009]3096号，贵州大学研究生创新基金项目2010011号，贵阳市科技计划项目[2011102]1-09号

The Discovery and Identification of Yeast Can Produce Cutinase, and Optimization of Fermentation Conditions

Ran Qinqin^1，2 Zhang Xiaoning² Zhang Wenkun¹ Zhang Xuejun^1，2 Zhang Mengmeng¹

(1. Guizhou Province Key Laboratory of Fermentation Engineering & Biological Pharmacy, Guizhou University, Guiyang 550025；2. School of Brewing and Food Engineering，Guizhou University，Guiyang 550025)

Received:2013-12-03 Published:2014-05-23 Online:2014-05-24

摘要/Abstract

摘要： 为得到有效水解杜仲角质层的角质酶，通过生物酶法提取杜仲中的活性成分。从病变的杜仲叶中分离出一株能高产角质酶的菌种，鉴定分析证实该菌株是胶红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)，这是首次从植物病原真菌以外发现产角质酶的酵母菌，并对该菌株发酵产角质酶的条件进行优化。这一发现意义重大，因为酵母菌比植物病原菌安全许多，更利于大规模生产。

关键词: 杜仲, 角质酶, 分离, 鉴定, 胶红酵母

Abstract: To get effective enzyme hydrolyze cutin of Eucommia ulmoides corneous layer, the extraction of the biological active compositions within Eucommia ulmoides was done using enzymatic hydrolysis. This article from the lesion Eucommia leaves isolated bacteria capable of producing cutinase and identify the bacteria, confirmed that the strain belongs to Rhodotorula mucilaginosa, and the strain producing cutinase fermentation conditions were optimized. This finding is significant, because the yeast more secure than plant pathogens is more suitable for mass production.

Key words: Eucommia ulmoides, Cutinase Isolation, Identification, Rhodotorula, Nucilaginosa

冉琴琴, 张效宁, 张文坤, 张学俊, 张萌萌. 产角质酶酵母菌的发现与鉴定及产酶条件的优化[J]. 生物技术通报, 2014, 0(5): 148-154.

Ran Qinqin, Zhang Xiaoning, Zhang Wenkun, Zhang Xuejun, Zhang Mengmeng. The Discovery and Identification of Yeast Can Produce Cutinase, and Optimization of Fermentation Conditions[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(5): 148-154.

参考文献

[1] 陆志科, 谢碧霞, 杜红岩.杜仲胶提取方法的研究[J].福建林学院学报, 2004, 4：353-356.
[2] 宫本红.杜仲叶多糖的提取分离及生物活性研究[D].贵阳：贵州大学, 2008.
[3] 龚桂珍, 宫本红, 张学俊, 等.杜仲叶和杜仲皮中化学成分的比较[J]. 西南大学学报：自然科学版, 2010, 7：167-172.
[4] 宋磊, 张学俊, 董大鹏, 王庆辉.杜仲胶性质及提取研究的进展[J].贵州化工, 2006, 4：4-8.
[5] Zhang X, Cheng C, Zhang M, et al. Effect of alkali and enzymatic pretreatments of Eucommia ulmoides leaves and barks on the extraction of gutta percha[J]. J Agric Food Chem, 2008, 56(19)：8936-8943.
[6] 张守亮, 陈坚.角质酶产生菌Thermobifida fusca WSH03-11诱变及高产突变株发酵条件优化[J].化工进展, 2006, 25(5)：533-537.
[7] 张瑶, 陈晟, 吴丹, 等.角质酶及其在纺织工业中的应用[J].中国生物工程杂志, 2010, 30(9)：105-109.
[8] 陈晟, 张芙华, 陈坚, 等.流加发酵对重组Bacillus subtilis发酵生产角质酶的影响[J].中国生物工程杂志, 2010, 30(1)：62.
[9] Murphy CA, Cameron JA, Huang SJ, et al. Fusarium polycaprolactone depolymerase is cutinase[J]. Applied and Environmental Microbiology, 1996, 62(2)：456-460.
[10] 王义勋, 柳艳军, 陈敏, 等.真菌角质酶研究进展[J].湖北林业科技, 2011, 4：12.
[11] 薛海燕.降解玉米秸秆产纤维素酶和木质素酶菌种的筛选[J].酿酒科技, 2008, 10：44-47.
[12] Fernandes S, Johansson G, Hatti-Kaul R. Purification of recombinant cutinase by extraction in an aqueous two-phase system facilitated by a fatty acid substrate[J]. Biotechnology and Bioengineering, 2001, 73(6)：465-475.
[13] Davies KA, DELorono I, Foster SJ, et al. Evidence for a role of cuti-nase in pathogenicity of Pyrenopeziza brassicae on brassicas[J]. Physicl Mol Plant Pathol, 2000, 57：63-75.
[14] Dickman MB, 谢旭阳.检验植物病原真菌产生角质酶的一种快速而灵敏的平板分析法[J].国外农学, 植物保护, 1988, 4：17.
[15] 张芙华, 华兆哲, 陈坚, 等.温度两阶段控制策略发酵生产重组角质酶[J].应用与环境生物学报, 2009, 15(5)：730-733.
[16] 郭森.重组大肠杆菌产角质酶-CBM发酵优化[D].无锡：江南大学, 2012.