生物技术通报 ›› 2022, Vol. 38 ›› Issue (1): 108-114.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2020-0481
李舒文(), 李殷睿智, 董笛, 王梦迪, 晁跃辉(), 韩烈保()
收稿日期:
2020-04-23
出版日期:
2022-01-26
发布日期:
2022-02-22
作者简介:
李舒文,女,硕士研究生,研究方向:草坪草分子生物学;E-mail: 基金资助:
LI Shu-wen(), LI Yin-rui-zhi, DONG Di, WANG Meng-di, CHAO Yue-hui(), HAN Lie-bao()
Received:
2020-04-23
Published:
2022-01-26
Online:
2022-02-22
摘要:
Senescence Associated Gene 113(SAG113)基因属于PP2Cc超家族,该基因的研究主要集中在植物衰老领域。为分析蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)MtSAG113基因的表达特征,探究MtSAG113基因的功能。该基因从蒺藜苜蓿中克隆得到,以烟草(Nicotiana tabacum L.)和蒺藜苜蓿R108为实验材料,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草获得具有抗性的转基因植株,并对逆境胁迫和外源激素诱导下蒺藜苜蓿MtSAG113基因的表达情况进行检测。结果显示:PCR检测成功获得5株转基因植株并在在烟草中成功表达,且转基因植株相比于野生型出现矮小和叶片早衰的表型;MtSAG113基因在衰老叶片中表达水平远远高于未衰老叶片;未处理的叶片中,该基因的表达水平随着时间的延长逐渐提高;干旱胁迫下,该基因表达水平随着时间推移显著提高;高盐胁迫下,该基因表达水平明显上调,在12 h达到峰值;该基因对6-BA诱导尤为敏感,表达水平随着时间推移显著提高,在4 h达到峰值,约为未处理的1 000倍;而在ABA和IAA诱导条件下,MtSAG113呈现类似的表达特征,从4 h开始提高,12 h达到峰值;亚细胞定位结果显示,该基因位于细胞核内。以上结果表明:MtSAG113基因可能在蒺藜苜蓿衰老调控上发挥着一定的作用;而高盐、干旱和外源激素对MtSAG113基因表达具有一定的调节作用,以上研究为进一步分析MtSAG113基因的功能提供基础。
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图1 转基因植株PCR检测 M:DNA marker DL 2000 plus II;1:WT;2-8:再生植株
Fig.1 PCR detection of transgenic plants M :DNA marker DL 2000 plus II; 1:WT; 2-8:regeneration plant
图2 转基因烟草RT-PCR检测 M:DNA marker DL 2000 plusⅡ;1:阴性对照;2-6:转基因烟草
Fig.2 RT-PCR detection of transgenic tobacco M :DNA marker DL 2000 plus Ⅱ; 1:negative control; 2-6:transgenic tobacco
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