敲减FST基因对猪成纤维细胞中相关基因表达的影响

生物技术通报 ›› 2014, Vol. 0 ›› Issue (6): 111-114.

敲减FST基因对猪成纤维细胞中相关基因表达的影响

孙亚蒙¹, 张冬杰², 汪亮², 张旭¹, 尹雪¹, 刘娣^1，2

（1.东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨 150030；2.黑龙江省农业科学院畜牧研究所，哈尔滨 150086）

收稿日期:2013-12-02 出版日期:2014-06-25 发布日期:2014-06-25
作者简介:孙亚蒙，男，博士研究生，研究方向：动物遗传育种与繁殖；E-mail：symbuster_1986@163.com
基金资助:
国家生猪产业体系岗位科学家项目（CARS-36）

FST-related Genes Expression in FST Gene Knock-down Pig Fetal Fibroblast Cells

Sun Yameng¹,Zhang Dongjie²,Wang Liang²,Zhang Xu¹,Yin Xue¹,Liu Di^1，2

（1. College of Animal Sciences and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150030；2. Research Institute of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150086）

Received:2013-12-02 Published:2014-06-25 Online:2014-06-25

摘要/Abstract

摘要： 旨在获得敲减FST基因的猪胎儿成纤维细胞，并探讨对相关基因表达的影响。将构建成功并鉴定准确的发夹RNA真核表达载体FR1-shRNA利用脂质体转染至猪胎儿成纤维细胞中，并进行G418筛选，获得稳定转染细胞株，并利用Real-time检测了相关基因表达的变化。结果表明，在稳定转染的细胞株中，FST基因的表达受到显著抑制，结果导致了ActivinRⅡA、Myostatin和Bmp4基因的表达出现下调趋势，并且极显著地降低MyoD基因的表达。

关键词: 卵泡抑素（FST）, RNA干扰, 猪胎儿成纤维细胞, 相关基因

Abstract: In order to obtain FST gene knock-down pig fetal fibroblast cells and investigate the effects of related gene’s expression, the short hairpin RNA eukaryotic expression vectors for FST was constructed and transfected into pig fetal fibroblast cells. After screened with G418, transfected stable cell clones were obtained, and Real-time PCR was used to detect FST-related genes change in gene’s expression. The results showed that in stably transfected cell lines, FST gene expression was significantly inhibited, then resulting in the expression of ActivinRⅡA, Myostatin and Bmp4 downward trend, and the expression of MyoD gene very significantly reduced.

Key words: Follistatin（FST）, RNA interference, Porcine fetal fibroblast cells, Related gene

孙亚蒙, 张冬杰, 汪亮, 张旭, 尹雪, 刘娣. 敲减FST基因对猪成纤维细胞中相关基因表达的影响[J]. 生物技术通报, 2014, 0(6): 111-114.

Sun Yameng,Zhang Dongjie,Wang Liang,Zhang Xu,Yin Xue,Liu Di. FST-related Genes Expression in FST Gene Knock-down Pig Fetal Fibroblast Cells[J]. Biotechnology Bulletin, 2014, 0(6): 111-114.

参考文献

[1] Shimasaki S, Koga M, Esch F, et al. Primary structure of the human follistatin precursor and its genomic organization[J] . Proc Natl Acad Sci USA, 1988, 85：4218-4222.
[2] Shimasaki S, Koga M, Esch F, et al. Porcine follistatin gene structure supports two forms of mature follistatin produced by alternative splicing[J] . Biochem Biophys Res Commun, 1988, 152：717-723.
[3] Patel K. Follistatin[J] . Int J Biochem Cell Biol, 1998, 30：1087-1093.
[4] Kondo S, Hashimoto M, Murata EY, et al. Identification of the two types of specific receptor for activin/EDF expressed in Friend Ieukemia and embryonal carcinoma cells[J] . Biochem Biophys Res Commun, 1989, 161：1267-1272.
[5] Shiozaki M, Sakai R, Tabuchi M, et al. Evidence f or the particip ation of endogenous activin-A/erythroid differemtiation factor in the regulation of erythropoiesis[J] . Proc Acad Sci USA, 1992, 82：1553-1556.
[6] Hashimoto M, Nakamura T, lnoue S, et al. Follistatinis develop-mentally regulated cytokine in neural different iation[J] . Biol Chem, 1992, 267：7203-7206.
[7] Lee SJ, Lee YS, Zimmers TA, et al. Regulation of muscle mass by follistatin and activins[J] . Mol Endocrinol, 2010, 24（10）：1998-2008.
[8] Fire A, Xu S, Montgomeny MK, et al. Potent and specific genetic int-erference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans[J] . Nature, 1998, 391（6669）：806-811.
[9] 张超, 罗艳梅, 张家骅, 等.激活素、抑制素及其受体与动物生殖作用的研究进展[J] .中国畜牧兽医, 2011, 38（2）：115-118.
[10] 孙亚蒙, 张冬杰, 张旭, 等.卵泡抑素基因过表达对其通路上相关基因表达的影响[J] .中国畜牧兽医, 2013, 40（5）：35-40.
[11] Shimasaki S, Moore RK, Erickson GF, et al. The role of bone morphogenetic proteins in ovarian function[J] . Reprod Suppl, 2003, 61：323-337.
[12] Lee H, Habas R, Abate-Shen C. MSX1 cooperates with histone H1b for inhibition of transcription and myogenesis[J] . Science, 2004, 304（5677）：1675-1678.
[13] Matzuk MM, Lu N, Vogel H. Multiple defects and perinatal death in mice deficient in follistatin[J] . Nature, 1995, 374：360-363.

[1]	潘国强, 吴思源, 刘璐, 郭惠明, 程红梅, 苏晓峰. 大丽轮枝菌（Verticillim dahliae）突变体库的构建与分析[J]. 生物技术通报, 2023, 39(5): 112-119.
[2]	周雪敏, 康丽鹃, 郭永妮, 杨笑含, 蒋易龙, 王泽龙, 孙倩, 康波. 不同日龄鸭肌肉组织多胺代谢和肌肉发育相关基因表达的规律[J]. 生物技术通报, 2022, 38(8): 244-251.
[3]	刘静静, 刘晓蕊, 李琳, 王盈, 杨海元, 戴一凡. 利用CRISPR/Cas9技术建立OXTR基因敲除猪胎儿成纤维细胞系[J]. 生物技术通报, 2022, 38(6): 272-278.
[4]	刘晓玫, 王东鑫, 张春, 魏双施. AAV介导的RNAi对SARS-CoV-2 S基因表达的抑制作用[J]. 生物技术通报, 2022, 38(3): 188-193.
[5]	郭宇飞, 闫荣媚, 张小茹, 曹威, 刘浩. 代谢工程改造黑曲霉生产葡萄糖二酸[J]. 生物技术通报, 2022, 38(11): 227-237.
[6]	潘银来, 邱春辉, 王艺磊, 张子平. RNA药物的发展及其在水产上的应用[J]. 生物技术通报, 2021, 37(2): 203-215.
[7]	邓普荣, 刘勇波. RNAi与转Bt基因技术协同抗虫研究进展[J]. 生物技术通报, 2021, 37(10): 216-224.
[8]	徐雪亮, 王奋山, 刘子荣, 范琳娟, 季香云, 蒋杰贤, 姚英娟. RNA干扰技术在昆虫学领域研究进展[J]. 生物技术通报, 2021, 37(1): 255-261.
[9]	胡濒月, 胡杨, 成文敏, 赵素梅, 赵红业, 魏红江. Leptin过表达对猪前脂肪细胞脂滴形成的研究[J]. 生物技术通报, 2020, 36(8): 111-119.
[10]	杨文文, 倪嘉瑶, 胡蕊洁, 王华忠. 一个RNAi载体上反向重复片段的测序策略[J]. 生物技术通报, 2020, 36(5): 205-210.
[11]	宋华丽, 孙效迎, 孔祥会, 李莉, 裴超. RNA干扰技术在水产动物抗病毒和抗寄生虫研究中的应用研究进展[J]. 生物技术通报, 2020, 36(2): 193-205.
[12]	许祥, 董维鹏, 张少华, 冯晨毅, 刘田福, 燕炯. Fsp27基因沉默载体的构建及其对细胞脂解的影响研究[J]. 生物技术通报, 2020, 36(1): 88-94.
[13]	庞鹏湘, 常燕楠, 尉瑞敏, 郜刚. 马铃薯StSRP1的克隆、表达及生物信息学分析[J]. 生物技术通报, 2019, 35(7): 10-16.
[14]	韩翠翠, 刘立琨, 王玉春, 杨莹, 刘吉成, 周忠光. TOX3基因RNAi慢病毒载体的构建及对乳腺癌ZR-75-1细胞增殖的影响[J]. 生物技术通报, 2019, 35(7): 141-147.
[15]	王佳悦, 刘香男, 彭康莉, 赵博. RNA干扰USE1基因慢病毒载体的构建及鉴定[J]. 生物技术通报, 2019, 35(3): 117-122.