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超抗原融合基因VEGF-SEA的克隆、原核表达及蛋白纯化

朱宏丽;孙嘉琳;罗金凤;   

  1. 天津科技大学生物工程学院,天津科技大学生物工程学院,天津科技大学生物工程学院 天津300457,天津300457,天津300457
  • 出版日期:2008-04-26 发布日期:2008-04-26
  • 基金资助:
    天津市科委应用基础研究重点项目(06YFJZJC02600)

  • Published:2008-04-26 Online:2008-04-26

摘要: 根据Genebank报道的VEGF(NM-003376)、SEA(A28664)基因序列,对密码子进行优化,合成血管内皮细胞生长因子和超抗原基因序列,将VEGF-SEA基因片段插入质粒pET22b构建重组质粒pET22b-VEGF-SEA。重组质粒经序列分析正确,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析蛋白条带与预期一致,证明融合蛋白原核表达成功。产物经His.Bind Buffer kit试剂盒纯化,纯度达到90%,这一成果为进一步研究VEGF-SEA融合蛋白的活性及其功能,探讨超抗原抑制肿瘤生长作用奠定了基础。

关键词: 超抗原, 融合蛋白, 原核表达, 复性