]*>","")" /> 侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

• 论文 • 上一篇    下一篇

侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

刘金亮;王凤婷;侯春喜;魏毅;张世宏;潘洪玉;   

  1. 吉林大学植物科学学院;吉林大学超分子材料与结构国家重点实验室;
  • 出版日期:2010-08-26 发布日期:2010-08-26
  • 基金资助:
    “十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAD08A08);; 吉林大学博士科研启动基金项目(4305050102B2);; 吉林大学基本科研业务费项目(200903376)

  • Published:2010-08-26 Online:2010-08-26

摘要: 从吉林长春感病辣椒上获得一黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分离物(CMV-CC),根据GenBank中已登录的CMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列设计简并引物,通过RT-PCR的方法克隆到了长度为657 bp的目的片段。序列分析表明,CMV-CC与CMVI组各分离物核苷酸同源性为93.2%-97.9%。根据完整CP基因核苷酸序列构建的系统进化树显示:38个CMV分离物可分为3个组,CMV-CC属于CMV的IB亚组。将CMV-CC CP基因与原核表达载体pET-22b(+)连接,在大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达出分子量约27 kD的融合蛋白。表达的融合蛋白经树脂纯化后免疫家兔制备了抗血清。用间接ELISA测定抗血清效价为1/4 096。Western blotting分析表明制备的抗血清对CP有高度特异性,为准确、快速地检测CMV奠定了基础。

关键词: 黄瓜花叶病毒, 辣椒, CP基因, 序列分析, 原核表达, 抗血清制备