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牦牛hnRNP K基因的克隆及序列分析

方鸿滨;王永;江明锋;陈达文;   

  1. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室;西南民族大学生命科学与技术学院;
  • 出版日期:2010-07-26 发布日期:2010-07-26
  • 基金资助:
    四川省青年重点基金项目(09ZQ026-011)

  • Published:2010-07-26 Online:2010-07-26

摘要: 为研究hnRNP K基因的生物学功能及其在牦牛中的特异性,利用RT-PCR和粘性末端连接法,分两段克隆了牦牛hnRNP K基因cDNA序列。序列分析结果表明,牦牛hnRNP K基因cDNA序列长11706bp,开放阅读框(ORF)长1389bp,编码463个氨基酸。序列比对结果表明,牦牛与黄牛hnRNP K cDNA序列的同源性达99.1%,编码的氨基酸同源性达到97.0%;在牦牛氨基酸序列中有15个突变。通过同源建模的方法成功构建了牦牛hnRNP K蛋白质三级结构,结果表明牦牛hnRNP K属于A型结构,而黄牛hnRNP K蛋白属于B型结构,其差异是由第459-463位氨基酸序列由"ADVEG"突变为"SGKFF"所致。乙酰化分析结果显示,牦牛hnRNP K对基因转录的影响水平跟黄牛是一致,表明不同物种hnRNP K功能的差异可能跟其氨基酸序列的差异有关。成功克隆的牦牛hnRNP K基因的cDNA序列为进一步分析该基因的功能提供参考。

关键词: 牦牛, hnRNP K, RT-PCR, 粘性末端连接法, 基因克隆, 蛋白质三级结构