氨基脱氧分支酸合成酶对Corynebacterium glutamicum SYPS-062积累L-丝氨酸的影响

氨基脱氧分支酸合成酶对Corynebacterium glutamicum SYPS-062积累L-丝氨酸的影响

苑亮;张晓梅;窦文芳;许泓瑜;许正宏;

江南大学医药学院制药工程研究室;江南大学工业生物技术教育部重点实验室;

出版日期:2011-06-26 发布日期:2011-06-26
基金资助:
国家“973”课题(2007CB707804);;国家“863”重点项目(2006AA020104);; 教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0380)

Published:2011-06-26 Online:2011-06-26

摘要/Abstract

摘要： 为阐明氨基脱氧分支酸合成酶(ADC合成酶)在Corynebacterium glutamicum SYPS-062体内积累L-丝氨酸过程中的作用,通过交叉PCR以及同源重组的方法敲除叶酸途径关键酶ADC合成酶的编码基因pabAB,构建了叶酸缺陷型菌株Corynebacterium glutamicum SYPS-062△pabAB,同时构建pabAB基因增强表达重组菌C.glutamicum SYPS-062(pJC I-pabAB)。分别考察了ADC合成酶对菌株生长的影响、对L-丝氨酸降解途径关键酶丝氨酸羟甲基转移酶(SHMT)的影响以及其对L-丝氨酸积累的影响。结果表明,与出发菌株相比,增强表达基因pabAB重组菌的ADC合成酶的酶活力提高了33%,SHMT酶的酶活力提高了30%,其最大比生长速率(μ_m)提高了48%,单位细胞产酸率(Yp/x)降低了36.2%;而敲除基因pabAB重组菌的ADC合成酶的酶活力降低了61%。SHMT酶的酶活力降低了20%,最大比生长速率降低了32%,单位细胞产酸率提高了12%。

关键词: pabAB基因, 同源重组, 基因敲除, 增强表达, ADC合成酶

苑亮;张晓梅;窦文芳;许泓瑜;许正宏;. 氨基脱氧分支酸合成酶对Corynebacterium glutamicum SYPS-062积累L-丝氨酸的影响[J]. .

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