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A型口蹄疫病毒VP0基因的克隆及原核表达

刘明;刘航;柳纪省;   

  1. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部兽医公共卫生重点开放实验室;
  • 出版日期:2012-01-26 发布日期:2012-01-26

  • Published:2012-01-26 Online:2012-01-26

摘要: 从实验室冻存的含A型口蹄疫病毒的细胞中提取FMDV总RNA,通过RT-PCR获得cDNA。并根据FMDV全基因组序列设计了一对针对VP0基因的引物,通过PCR扩增得到目的基因VP0并亚克隆入pMD18-T载体。将鉴定出的阳性质粒和表达载体pET32a用BamHⅠ和HindⅢ双酶切回收后连接获得阳性重组质粒pET32-VP0。用IPTG诱导重组质粒表达目的蛋白VP0并用SDS-PAGE进行检测。表达产物用镍亲和树脂进行了纯化。结果证明,口蹄疫病毒VP0蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达且表达产物得到了纯化,为实验室进一步的研究提供了重要的材料。

关键词: 口蹄疫病毒, VP0基因, 原核表达