植原体免疫主导膜蛋白Imp基因原核表达载体构建及表达

植原体免疫主导膜蛋白Imp基因原核表达载体构建及表达

柴化建;赵海泉;张丽君;罗焕亮;

安徽农业大学生命科学学院;深圳市职业技术学院;深圳出入境检验检疫局;

出版日期:2012-06-26 发布日期:2012-06-26
基金资助:
深圳市科技计划项目(JC200903180710A)

Published:2012-06-26 Online:2012-06-26

摘要/Abstract

摘要： 旨在构建植原体免疫主导膜蛋白Imp基因原核表达载体,并进行初步表达。以重组克隆质粒pMD18-T-Imp为模板,PCR扩增Imp基因片段。构建表达载体pET-28a(+)-Imp,转化宿主菌E.coliBL21(DE3)。筛选阳性克隆,提取重组质粒作PCR鉴定、酶切鉴定及IPTG诱导表达鉴定。PCR及双酶切结果显示,重组质粒pET-28a(+)-Imp构建成功。经IPTG诱导BL21(pET-28a(+)-Imp)表达约20 kD的蛋白,与预期的携带6×His-Tag的目的蛋白(19.5 kD)大小相符,主要以包涵体形式存在。结果显示,构建的表达载体pET-28a(+)-Imp在E.coliBL21(DE3)中能够达一定量表达,为进一步纯化Imp蛋白奠定基础。

柴化建;赵海泉;张丽君;罗焕亮;. 植原体免疫主导膜蛋白Imp基因原核表达载体构建及表达[J]. .

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