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人类多效生长因子(Pleiotrophin)的全基因合成、原核表达与纯化

马兰;季朝能;   

  1. 复旦大学生命科学学院遗传学研究所;
  • 出版日期:2012-07-26 发布日期:2012-07-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30770427);;

  • Published:2012-07-26 Online:2012-07-26

摘要: PTN作为重要的细胞因子,存在于多种生物体内,参与多种生物学过程,具有刺激细胞增殖、分化、粘附、迁移等多种功能。根据PTN的基因序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,人工合成ptn基因,构建pMAL-his-sumo-ptn重组表达载体,将重组表达载体转化到E.coli(Rosetta)中并进行优化表达。融合蛋白在0.4 mmol/L IPTG、37℃条件下诱导3 h表达量最高。收集菌体、纯化、酶切、SDS-PAGE可检测到分子量为18 kD左右的重组蛋白。

关键词: 人类多效生长因子基因, 密码子优化, 全基因合成, 原核表达, 融合蛋白