根癌农杆菌介导甘蔗遗传转化Bt（cry1Ab）基因

生物技术通报 ›› 2013, Vol. 0 ›› Issue (2): 100-105.

根癌农杆菌介导甘蔗遗传转化Bt（cry1Ab）基因

李晓梅¹ 王闵霞² 秦廷豪¹ 阳翠¹ 安琪¹ 张军¹

（1. 四川省植物工程研究院生物技术研究所，资中 612400; 2. 四川省农业科学研究院生物与核技术研究所，成都 610000）

收稿日期:2012-07-30 修回日期:2013-02-27 出版日期:2013-02-26 发布日期:2013-02-27
作者简介:李晓梅，女，硕士，助理研究员，研究方向：蔬菜学；E-mail ：lxmusl@126.com
基金资助:
四川省科技计划项目（2010CJY0047）

Genetic Transformation of Bt（cry1Ab）Gene into Sugarcane（Saccharum officinarum L.）Mediated by Agrobacterium tumefaciens

Li Xiaomei¹ Wang Minxia² Qin Tinghao¹ Yang Cui¹ An Qi¹ Zhang Jun¹

（1. Biotechnology Institute of Sichuan Plant Engineering Academy，Zizhong 612400 ；2. Biotechnology and Nuclear Institute of Sichuan Agricultural Academy，Chengdu 610000）

Received:2012-07-30 Revised:2013-02-27 Published:2013-02-26 Online:2013-02-27

摘要/Abstract

摘要： 以自育甘蔗品种“川蔗23 号”诱导的胚性愈伤为受体材料，首次用较低的根癌农杆菌侵染浓度（OD600=0.1 左右）与较短的侵染时间（1.5 min）成功实现甘蔗遗传转化Bt（cry1Ab）基因。结果表明，胚性愈伤分化与小芽生根最适潮霉素筛选浓度分别为20 mg/L 和30 mg/L ；愈伤组织胚性的一致性是影响筛选阶段愈伤再生的重要因素，培养40 d 的愈伤组织为转化最适受体；转化材料经连续的潮霉素抗性筛选后，获得65 株抗性植株，通过特异性引物的PCR 扩增检测，有2 株获得阳性条带，初步表明目的基因已整合到甘蔗染色体基因组中。

关键词: 甘蔗, 遗传转化, Bt（cry1Ab）基因

Abstract: In this research, embryonic callus induced from sugarcane（Saccharum officinarum L.）cultivar “Chuanzhe 23” was selected as recipient material. We successfully transformed anti-insect gene Bt（cry1Ab）into sugarcane mediated by Agrobactenum tumefaciens EHA105 when the explants infected with lower concentration of Agrobactenum tumefaciens（OD ≈ 0.1）and shorter infusion time（1.5 min）. The optimal concentrations of hygromycin for the selection of transformed shoots and roots induction respectively were 20 mg/L and 30 mg/L. The calli cultured for 40 d were optimal for transformation; 65 transformants were obtained after successive hygromycin resistance selection. The hyg-resistant plants were detected by PCR analysis, and 2 plants showed positive, which initially proved that the target gene had been integrated into sugarcane genome．

Key words: Sugarcane（Saccharum officinarum L.）, Genetic transformation, Bt（cry1Ab）gene

李晓梅, 王闵霞, 秦廷豪, 阳翠, 安琪, 张军. 根癌农杆菌介导甘蔗遗传转化Bt（cry1Ab）基因[J]. 生物技术通报, 2013, 0(2): 100-105.

Li Xiaomei Wang Minxia Qin Tinghao Yang Cui An Qi Zhang Jun. Genetic Transformation of Bt（cry1Ab）Gene into Sugarcane（Saccharum officinarum L.）Mediated by Agrobacterium tumefaciens[J]. Biotechnology Bulletin, 2013, 0(2): 100-105.

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