生物技术通报

高效毛细管电泳

John Frenz

1992, 0(07): 1-3.

摘要 ( 74 )

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<正> 在过去十年里,应用重组DNA方法生产药用治疗蛋白推动了分析和鉴定生物分子新技术的发展。高效毛细管电泳(HPCE)使生物化学家、分析化学家以及层析工作者产生了极大的兴趣,现已成为一个分辨率极高的分离技术,其分离效率和应用广度胜于高效液相色谱法(HPLC)。人们预计,HPCE将成为生物技术产业,尤其是高度精确地鉴定重组DNA产物的一个重要工具。迄今为止,在此领域里应用最多的仍然是HPLC(蛋白质分析和纯化)和凝胶电泳(蛋白质及核酸分析)。

动态

1992, 0(07): 4-20.

摘要 ( 79 )

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<正> 转基因微生物活体在国际上的首次出售澳大利亚政府已允许在国际范围内出售一种遗传工程细菌,它能有效地抗根癌土壤杆菌造成的冠瘿。早在1988年,Bio-Care Technology Pty公司已获准在新南威尔士销售杀虫剂,但获澳大利亚政府批准进行遗传释放却是近期的事。Adelaide大学的Allan Kerr及其同事在1972年发现,非致病细菌Agrobacterium radiobacterK84能有效防止冠瘿的产生。但田间试验表明,最终会使根癌土壤杆菌产生抗性。已发现K84产生一种毒素,

核酸及蛋白质合成、提取、纯化

1992, 0(07): 21-24.

摘要 ( 94 )

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<正> 922362 生物颗粒的浓缩系统[专,俄]/Res.Inst.Appl.Microbiol./SU 1603-281:18.02.88-SU-380687(30.10.90)18.02.88 as 380687.91-293384/40(3页)[译自DBA,1991,10(25),91-14574] 该系统有一个水平缓冲液容器,内含电极和一个小室(?)聚集室,它由一个垂直的透析膜与阳极分开。系统中还有一个电渗膜,由一个多孔栅与小室-聚集室分开,孔栅在阴极室与渗析膜平行放置。阳极和阴极室内的电极缓冲液同量。在电场中,通过膜发生液体移动。如果膜带有负电,缓冲液从阳极流向阴极。若带正电则相反。本系统可用于浓缩

质粒研究与载体构建

1992, 0(07): 21-21.

摘要 ( 24 )

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<正> 922365 甲基营养细菌中新质粒的鉴别[英]/Brenner,V.…∥Antonie Leeuwenhoek J.Microbiol.-1991,60(1).-43～48[译自DBA,1991,10(25),91-14504] 从50种甲基营养菌菌株(其中30种来自土壤)中筛选质粒DNA。用碱性清除溶菌物法从专性甲基营养型甲基单胞菌属(Methylomonas sp.)菌株R103a中分离出36kb质粒pIH36,并构建了其限制性图谱。检测了甲基杆菌属(Methylobacterium)桃红色色素的兼性甲基营养菌中的4种质粒;菌株R15d中的质粒plB200(200kb)和pIB14(14kb),菌株M17中的pWU14(14kb)和

DNA分析与扩增

1992, 0(07): 24-30.

摘要 ( 77 )

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<正> 922381 温度和寡核苷酸引物长度对聚台酶链反应扩增专一性和有效性的影响[英]/Wu,D.Y.…∥DNACell Biol.-1991,10(3).-233～238[译自DBA, 1991,10(25),91-14514] 由于温度和寡核苷酸控制寡核苷酸杂交的专一性,因此研究了寡核苷酸长度(14～20个核苷酸)、碱基组成及退火温度对PCR扩增专一性和有效性的影响。一般情况下,PCR专一性受寡核苷酸长度或引物与模板的退火温度控制。测定了寡核苷酸

基因诱变、重组、克隆

1992, 0(07): 30-36.

摘要 ( 69 )

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<正> 922411 人胃H,K-ATP酶β-亚基的cDNA克隆[英]/Ma,J.…∥Bioehem.Biophys.Res.Commun.-1991,180(1).-39～45[译自DBA,1991,10(25),91-14505] 利用两个寡核苷酸DNA探针(由来自相应的大鼠和家兔ATP酶β-亚基的cDNA序列组成),从人胃粘膜噬菌体λ-gt10基因文库中分离出编码胃H+/K+-转运ATP酶的全长eDNA克隆。将插入序列再克隆到质粒噬菌体pBluescript-Ⅱ-SK+中,测定基因的DNA序列。插入序列长1407bp.编码分子量为33367的291个氨基酸的肽。它与家

基因标记、转化、表达与检测

1992, 0(07): 36-41.

摘要 ( 73 )

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<正> 922444 通过诱导T7 RNA聚合酶强烈抑制氯霉素乙酰转移酶的表达[英]/Kim,H.B.…∥Biotechnol.Lett.-1991,13(10).-751～754[译自DBA,1991,10(25),91-14511] 通过诱导大肠杆菌中的噬菌体T7表达系统强烈抑制氯霉素乙酰转移酶的表达。消化了质粒pYEJ001(含带有大肠杆菌核糖体结合位点序列的无启动子cat基因)和质粒pGEM3(带有T7和SP6启动子),将连接混和物导入大肠杆菌。含由T7和SP6启动子调控的cat基因的质粒分别称为pT7CAT和pSP6CAT。即使在无RNA聚合酶条件

基因库构建

1992, 0(07): 41-41.

摘要 ( 67 )

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<正> 922472 从人21染色体构建并鉴定酵母人工染色体部分文库[英]/Bellis,M.…∥DNA Cell Biol.-1991,10(4).-301～310[译自DBA,1992,11(1),92-00024] 构建酵母人工染色体(YAC)的一般方法是:琼脂糖制备DNA、EcoRI部分酶切、脉冲电场凝胶电泳(PFGE)对片段大小的筛选、反向电场电洗脱(field-inversion electroelution)、连接、用PFGE选择大小并消除未连接载体、洗脱、转化酿酒酵母、铺板于ura~-、trp~-培养基上、复印到尼尤膜上、筛选人源克隆。以体细胞杂交系WA-17(人源部分只有21染色体)在质粒pYAC4中

抗生素和干扰素

1992, 0(07): 42-43.

摘要 ( 106 )

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<正> 922474 酶反应工程:在有机助溶剂存在下利用稳定的PGA催化抗生素合成[英]/Fernandez-Lafuente,R.…∥Enzyme Microb.Technol.-1991,13(11).-898～905[译自DBA,1991,10(25),91-14636] 利用Kluyvera citrophila青霉素-G-酰基转移酶(PGA)的多点共价接触Sepharose CL-6B衍生物,可由苯乙酸(PAA)和6-氨基青霉烷酸(6-APA)合成青霉素G。反应是在含15ml PGA-琼脂糖衍生物的填充床式反应器中进行的,用100ml反应溶液(溶解于水-助溶剂混合物中的250mM

疫苗

1992, 0(07): 43-47.

摘要 ( 97 )

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<正> 922482 在酵母菌和杆状病毒系统中表达的以gP195的C-末端加工片段为基础的重组多肽的免疫学研究[会,英]/Chang,S.P.…∥Amer.J.Trop.Med.Hyg.-1991,45(3),Suppl.-268[译自DBA,1991,10(25),91-14663] 研究了恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)主要子孢子体表面蛋白(gp195)作血期疟疾疫苗的可能性。在酵母菌细胞内产生了42kDa的C-末端重组多肽,用重组杆状病毒感染的昆虫细胞培养物中也分泌42kDa区段。用天然gp195单克隆抗体识别,这两种表达的抗原决定基有差别。比

激素和活性多肽

1992, 0(07): 47-49.

摘要 ( 76 )

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<正> 922498 生物活性生长激素单体的纯化[专,英]/Monsanto/EP-445-099:28.02.90-US-486476(04.09.91)07.02.91 as 870033.91-261823/36(16页)[译自DBA,1991,10(25),91-14656] 方法包括:i.获得生长激素单体和寡聚体蛋白混合液,pH大于7(最好大于10);ii.降低pH小于6(4～5.5),沉淀寡聚体而保留单体;iii.去沉淀,获得溶解的生长激素蛋白。该生长激素是从N-蛋氨酰牛生长激素,N-丙氨酰牛生长激素和N-丙氨酰猪生长激素中筛选的。寡聚体含量最好

动物细胞培养及单克隆抗体

1992, 0(07): 49-53.

摘要 ( 103 )

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<正> 922508 搅拌生物反应器中杂交瘤细胞对流体动力剪切的生物学反应[英]/Abu-Reesh,Ⅰ.…∥EnzymeMierob.Technol.-1991,13(11).-913～919[译自DBA,1991,10(25),91-14978] 小鼠-小鼠杂交瘤HDP-1产生抗2,4-二硝基苯的IgG单克隆抗体(MAb)。在37℃下将其培养在装有浆状叶轮的连续搅拌槽培养器(250ml摇瓶)中。研究了搅拌速度(100～400rpm)、稀释

医药其它

1992, 0(07): 53-59.

摘要 ( 80 )

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<正> 922535 HIV-1gag和env基因免疫显性区产生的重组蛋白及其应用于血清学诊断的潜力[英]/Kovac,J.∥Acta Virol.-1991,35(4).-383～390[译自DBA,1991,10(25),91-14692] 根据已发表的HIV-1病毒分离株的顺序选择出含免疫显性表位的gag和env基因高保守区,并在大肠杆菌中表达。将gag基因的627bp片段和env基因的523bq片段插入到质粒pKK233-2中,在大肠杆菌JM105中分别得到质粒pKK24和pKK41。表观分子量为25000和21000的2种蛋白能与来自HIV-1血清阳性株的血清反应,但不能与普通血清反应。由于pKK41基因产物的表达不能满足纯化

生物防治

1992, 0(07): 59-62.

摘要 ( 88 )

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<正> 922568 开发表达昆虫专性神经毒素的杆状病毒用作生防剂的潜力[英]/McCutchen,B.F.…∥Bio/Technology.-1991,9(9).-848～852E译自DBA,1991,10(25),91-14753] 将编码蝎子Androctonus australis昆虫专性毒素(AaIT)的DNA片段插入苜蓿银纹夜蛾(Autographa californica)核多角体病毒(AcNPV)转移载体质粒pAcUW2 p10启动子下游和核多角体基因上游处。用该质粒DNA和核多

生物固氮

1992, 0(07): 62-64.

摘要 ( 104 )

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<正> 922582 光合同氮菌深红红螺菌人工DNA介导的遗传转化[英]/Fitzmaurice,W.P.…∥Arch.Microbiol.-1991,156(2).-142～144[译自DBA,1992,10(25),91-14770] 用CaCl_2、CaCl_2-PEG6000和冻融法,以载体质粒pSa4转化深红红螺菌(Rhodospirillumrubrum)VR2(一种天然的链霉素抗性突变株)。DNA浓度低时,转化频率呈线性增加,较高浓度时则达到饱和。在用抗生素筛选前,用对数生长早期和静止生长早期的细胞,1～2分钟热激、37℃、200mM CaCl_2、表达5小时的转化最佳。

组织与原生质体培养

1992, 0(07): 64-68.

摘要 ( 62 )

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<正> 922589 利用改良C17培养基和膜筏进行澳大利亚小麦种质花药培养[英]/Luckett,D.J.…∥Aust.J.Plant Physiol.-1991,18(4).-357～367[译自DBA,1991,10(25),91-4784] 利用9个春小麦(Triticum aestivum)栽培种和3个F_1代杂种进行了小麦花药培养实验,以建立双单倍体生产的工作体系。进行了下列实验:(1)6150个花药(205个穗)培养在高压灭菌的C17培养基(85D12培养基)上,选用液体C17培养基覆盖;(2)7644个花药(254个穗)培养在

植物遗传工程

1992, 0(07): 68-80.

摘要 ( 49 )

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<正> 922617 香瓜转化及花椰菜花叶病毒35S启动子在转基因香瓜植物中的表达[英]/Dong,J.Z.…∥Bio/Technology.-1991,9(9).-858～863[译自DBA,1991,10(25),91-14786] 香瓜(Cucumis melo L.Cv.Orientsweet)繁殖过程是:(1)在加0.5mg/l BA的MS培养基上诱导丛生苗;(2)在加0.1mg/l BA和2 mg/l GA的MS培养基上使芽伸长;(3)在加0.1mg/lNAA的MS培养基上发根。总的再生率高于90%。此方法与根癌土壤杆菌介导转化结合使

动物遗传工程

1992, 0(07): 80-84.

摘要 ( 78 )

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<正> 922674 在转基因猪泌乳期生产小鼠乳清酸性蛋白[英]/Shamay,A.…∥J.Anita.Sci.-1991,69(11),4552-4562[译自DBA,1991,10(25),91-14519] 小鼠乳清酸性蛋白(WAP)全长编码区有4个外显子、3个内含子和2.6kb5′-侧链及1.6kb3′-侧链。将含有上述成分的7.2kb EcoRI片段注入猪卵。用Southem blot分析尾尖活体解剖样品的DNA,证实有二个系列的转基因猪携带小鼠WAP基因。五个品系的泌乳母猪奶中有小鼠重组WAP,

农业其它

1992, 0(07): 84-85.

摘要 ( 89 )

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<正> 922703 离体繁殖香蕉的体细胞克隆变异体的定性分析[英]/Israeli,Y.…∥Sci.Hortic.(Amsterdam).-1991,48(1～2).-71～88[译自DBA,1991,10(25),91-14844] 对离体繁殖的Cavendish亚类7个香蕉(Musa sp.)栽培种Williams、Grand Nain、Nat-han、Arnon、Shai、Eilon和Red的体细胞克隆变异体进行了定性分析。结果表明,矮态变异体最普遍,品种Red高株突变体极少,无矮状变异体出现。第二个最普遍的变异体是叶厚度不同、橡胶状窄叶呈现不同的白绿斑点(嵌合状)。据推测,这

食品上的应用

1992, 0(07): 85-92.

摘要 ( 93 )

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<正> 922707 用不同氮源培养的海藻杜氏藻中的β-胡萝卜素、维生素C和维生素E含量[英]/Abalde,J.…∥Bioresource Technol.-1991,38(2～3).-121～125[译自DBA,1991,10(25),91-14876] 利用以海水为基础的含有不同氮源的培养基检验了由杜氏藻(Dunaliella tertiolecta)生产β-胡萝卜素、抗坏血酸和生育酚。于17～19℃和盐浓度35%、光强度120μE/m~2·sec(光周期12hr)进行培养。用尿素时获得的细胞密度为7.53百万细胞/ml,用亚硝酸盐和铵时(分别为5.45和5.60百

环境保护及农业废物利用

1992, 0(07): 92-94.

摘要 ( 67 )

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<正> 922747 代谢芳香化合物的土壤细菌儿茶酚-1,2-二加氧酶同工酶[英](?)/Murakami,S.…∥Soil Biol.Biochem.-1991,23(9).-815～819[译自DBA,1991,10(25),91-15145] 试验了培养在苯胺(作为唯一碳源和氮源)中的来自土壤的16种细菌分离物的儿茶酚-1,2-二加氧酶(CD)的同工酶。按其同工酶特性可将这16种微生物[包括红球菌(Rhodococcns erythropolis)、产碱菌(Alcaligenes)、假单胞菌(Pseudomonas)、不动杆菌(Acinetobacter)等],分为3组:①具有相同活性的两种同工酶;②具有

本期文摘分类索引

1992, 0(07): 94-96.

摘要 ( 74 )

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