抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法

doi:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0701

生物技术通报 ›› 2020, Vol. 36 ›› Issue (5): 64-67.doi: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0701

• 生物分析方法与标准物质专题（专题主编：李亮副研究员） • 上一篇下一篇

抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法

李葱葱¹, 谢苹¹, 董立明¹, 夏蔚¹, 兰青阔², 闫伟¹, 龙丽坤¹, 李飞武¹

1.吉林省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所,长春 130033;
2.天津市农业质量标准与检测技术研究所,天津 300381

收稿日期:2019-08-06 出版日期:2020-05-26 发布日期:2020-06-03
作者简介:李葱葱,男,副研究员,研究方向：转基因生物安全;E-mail：licongcong1100@163.com
基金资助:
转基因重大专项课题（2018ZX08012-001）

Qualitative PCR Assay for the Detection of GH5112E-117C Transgenic Maize Resistant to Insects and Herbicides

LI Cong-cong¹, Xie Ping¹, DONG Li-ming¹, XIA Wei¹, LAN Qing-kuo², YAN Wei¹, LONG Li-kun¹, LI Fei-wu¹

1. Institute of Agricultural Quality Standard and Testing Technology,Jilin Academy of Agricultural Sciences,Changchun 130033;
2. Tianjin Institute of Agricultural Quality Standard and Testing Technology,Tianjin 300381

Received:2019-08-06 Published:2020-05-26 Online:2020-06-03

摘要/Abstract

摘要： 转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C是由北京奥瑞金公司研发的转mG2-aroA基因和mcry1Ah基因抗虫耐除草剂玉米新品系,对玉米螟、粘虫等鳞翅目害虫具有抗性、耐草甘膦除草剂的转基因玉米,在我国具有重要产业化应用前景。本文研发了GH5112E-117C转基因玉米的定性PCR检测方法,该方法能特异性地检测转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C,在每个反应引物浓度为0.2 μmol/L、Taq DNA 聚合酶0.625 U、DNA模板50 ng,退火温度为58℃的条件下,检测灵敏度可稳定达到0.1%。该方法为转基因抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C的精准检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑。

关键词: 转基因玉米, 转化事件, PCR, 检测方法

Abstract: Transgenic maize GH5112E-117C is a new strain with mG2-aroA gene and mcry1Ah genes and developed by Beijing Origen Company. It is resistant to lepidopteran pests such as corn borer and armyworm,and it is tolerant to glyphosate- herbicide. Thus this strain has important industrial application prospects in China. A qualitative PCR assay for transgenic maize GH5112E-117C was developed in this paper. The assay had promising specificity to detect the transgenic maize GH5112E-117C with resistance to insects and tolerance to herbicide. At a concentration of 0.2 μmol/L primer,TaqDNA polymerase 0.625 U,DNA template 50 ng,and an annealing temperature of 58℃,the detection sensitivity of the assay stably achieved to 0.1%. This assay provides a new technical means for accurately testing insect- and herbicide-resistant transgenic maize GH5112E-117C,which provides the technical support for transgenic supervision in agriculture.

Key words: transgenic maize, transformation event, PCR, detection assay

李葱葱, 谢苹, 董立明, 夏蔚, 兰青阔, 闫伟, 龙丽坤, 李飞武. 抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法[J]. 生物技术通报, 2020, 36(5): 64-67.

LI Cong-cong, Xie Ping, DONG Li-ming, XIA Wei, LAN Qing-kuo, YAN Wei, LONG Li-kun, LI Fei-wu. Qualitative PCR Assay for the Detection of GH5112E-117C Transgenic Maize Resistant to Insects and Herbicides[J]. Biotechnology Bulletin, 2020, 36(5): 64-67.

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抗虫耐除草剂玉米GH5112E-117C定性PCR检测方法

Qualitative PCR Assay for the Detection of GH5112E-117C Transgenic Maize Resistant to Insects and Herbicides

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