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中间锦鸡儿种子特异性fad2基因克隆及fad2-1A基因酵母表达载体的构建

林萍;李春秀;齐力旺;张守攻;   

  1. 中国林业科学研究院林业研究所,中国林业科学研究院森林环境与保护研究所,中国林业科学研究院林业研究所,中国林业科学研究院林业研究所 北京100091,北京100091,北京100091,北京100091
  • 出版日期:2008-04-26 发布日期:2008-04-26
  • 基金资助:
    国家科技支撑项目“优质抗逆生态树种柠条、蒙古栎新品种选育”(2006BAD01A1606);; 国家863计划“抗旱、耐盐碱优质柠条新品种选育”(2002AA241091)

  • Published:2008-04-26 Online:2008-04-26

摘要: Δ12脂肪酸脱氢酶(Δ12 fatty acid desaturase,Δ12 FAD,也称为fad2)催化油酸生成亚油酸,是植物体内生成多不饱和脂肪酸的关键酶,种子中特异表达的fad2基因负责种子贮脂中多不饱和脂肪酸亚油酸的生成,决定种子油脂的成分和营养价值。采用RT-PCR和RACE技术从中间锦鸡儿未成熟种子中克隆了种子特异表达的fad2-1A、fad2-1B基因,fad2-1A编码的前283个氨基酸与fad2-1B的同源性高达98.9%,前者比后者多编码97个氨基酸,全部氨基酸残基的同源性为70.71%。将fad2-1A克隆到真核表达载体pYES2中,构建了重组质粒pYES2-fad2-1A,经PCR检测、质粒酶切、测序等检测,目的基因确实插入重组质粒,且方向正确,为进一步研究fad2基因的功能和表达调控机理奠定了基础。

关键词: 中间锦鸡儿, fad2基因, 克隆, 真核表达载体