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狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定

李江涛;李轶女;殷相平;邹媛媛;张志芳;柳纪省;   

  1. 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,中国农业科学院生物技术研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,中国农业科学院生物技术研究所,中国农业科学院生物技术研究所,中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室 兰州730046,北京100081,兰州730046,北京100081,北京100081,兰州730046
  • 出版日期:2008-06-26 发布日期:2008-06-26
  • 基金资助:
    甘肃省自然基金项目(3ZS051-A25-076);; 甘肃省科技攻关(2GS0S2-A41-006-02)

  • Published:2008-06-26 Online:2008-06-26

摘要: 用RT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基。将目的基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol∕L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础。

关键词: 狂犬病病毒, 核蛋白, 原核表达