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携带PTEN基因的重组腺病毒表达载体构建的研究

韦永琼;曾照芳;   

  1. 重庆医科大学检验系临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室重庆市重点实验室;
  • 出版日期:2009-01-26 发布日期:2009-01-26

  • Published:2009-01-26 Online:2009-01-26

摘要: 构建携带抑癌基因PTEN(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)的重组腺病毒表达载体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定基础。采用RT-PCR法从大鼠海马神经元扩增目的基因PTEN,克隆人含绿色荧光蛋白(Green fluorescence protein),GFP基因的pAdTrack-CMV穿梭质粒,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌内进行同源重组;获得重组腺病毒质粒,经PacI线性化后,转染AD293细胞。结果表明,感染腺病毒载体的AD293细胞表达GFP基因,随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应(Cytopathic effect,CPE),经PCR对传代的Ad-PTEN分析证实得到目的基因。成功构建了携带PTEN基因的腺病毒表达载体,为研究PTEN的功能和作用机制奠定了基础。

关键词: PTEN基因, 重组腺病毒, 载体, 构建