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来源于大肠杆菌的6-磷酸己酮糖合成酶和6-磷酸果糖异构酶的原核表达与活性测定

马莉;陈丽梅;年洪娟;   

  1. 昆明理工大学生物工程技术研究中心;
  • 出版日期:2009-08-26 发布日期:2009-08-26
  • 基金资助:
    国家自然科学基金项目(30670163);; 云南省中青年学术与技术带头人培养费;; 昆明理工大学人才培养费(2004PY01-5)

  • Published:2009-08-26 Online:2009-08-26

摘要: 同源性搜索显示大肠杆菌中存在核酮糖单磷酸途径关键酶6-磷酸己酮糖合成酶(HPS)和6-磷酸果糖异构酶(PHI)基因的同源序列,但没有其相关活性和功能方面的报道。本研究利用PCR方法从大肠杆菌的基因组中扩增hps和phi的同源序列(分别简称为Ehps和Ephi),构建了大肠杆菌Ehps和Ephi基因的原核表达载体pDEST17-Ehps和pDEST17-Ephi,表达和纯化了重组蛋白EHPS和EPHI,酶活性检测结果表明EHPS和EPHI具有活性。

关键词: 6-磷酸己酮糖合成酶, 6-磷酸果糖异构酶, 原核表达, 重组蛋白纯化