]*>","")" /> 铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建

• 论文 • 上一篇    下一篇

铜绿假单胞菌荧光实时定量PCR标准品的构建

孙飞龙;邱志刚;金敏;郭向飞;王新为;吴道澄;李君文;   

  1. 西安交通大学生命科学与技术学院;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;西安工程大学环境与化学工程学院;
  • 出版日期:2009-10-26 发布日期:2009-10-26

  • Published:2009-10-26 Online:2009-10-26

摘要: 构建了荧光实时定量PCR标准品以检测水中的铜绿假单胞菌。利用所报道的铜绿假单胞菌gyrA基因为目的基因设计引物,通过培养细胞,煮沸法裂解细胞后做PCR,电泳,胶回收,然后与pMD19-TVector连接并转化到感受态大肠杆菌中;氨苄青霉素筛选出白色菌落,菌落PCR及测序鉴定其特异性,根据OD值确定浓度,制备梯度浓度参考标准品,制作标准曲线,检测水样品中铜绿假单胞菌的菌量。

关键词: 铜绿假单胞菌, 克隆, 标准品, 荧光实时定量PCR, 检测