]*>","")" /> 萼脊兰ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义基因表达载体的构建

• 论文 • 上一篇    下一篇

萼脊兰ACC氧化酶基因片段的克隆及其反义基因表达载体的构建

崔波;李长看;马杰;张仙云;袁秀云;叶永忠;   

  1. 河南农业大学生命科学学院;郑州师范高等专科学校生物工程研究所;
  • 出版日期:2009-12-26 发布日期:2009-12-26
  • 基金资助:
    河南省科技攻关项目(092102110128)

  • Published:2009-12-26 Online:2009-12-26

摘要: 根据已报道的几种不同属的兰科植物ACO基因序列,设计并合成了一对特异引物,以萼脊兰的基因组DNA为模板,用PCR扩增方法克隆出萼脊兰ACO基因的部分片段,将其连接到pMD19-T质粒载体上进行测序。结果显示,该片段的长度为333bp,序列和蝴蝶兰(Phalaenopsis hybrid)、卡特兰(Cattleya intermedia)、两棱蕾丽兰(Laelia anceps)的相应ACO片段的同源性分别达到达到99.7%、92.49%和92.19%;和大花蕙兰(Cymbidium hybrid)、石斛兰(Dendrobium crumenatum)的同源性分别是89.49%和89.19%。将此片段反向插入植物表达载体pBI221的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,成功构建了萼脊兰ACO的反义基因植物表达载体pBI-antiACO。

关键词: 萼脊兰, ACC氧化酶, 克隆, 反义载体