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野生黄花苜蓿冷诱导基因克隆及序列分析

刘亚玲;王俊杰;云锦凤;赵彦;石凤敏;   

  1. 内蒙古农业大学生态环境学院;内蒙古草品种育繁工程技术中心;内蒙古农牧业科学院;
  • 出版日期:2010-04-26 发布日期:2010-04-26
  • 基金资助:
    国家科技支撑项目(2008BADB3B06-03);; 国家自然科学基金项目(30760159);; 内蒙古农业大学博士科研启动基金项目(BJ08-7)

  • Published:2010-04-26 Online:2010-04-26

摘要: 根据紫花苜蓿抗寒基因cas15B(登录号:L12462)的cDNA序列,设计1对特异引物,以经过低温胁迫的黄花苜蓿总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆获得了550bp的cDNA片段。测序和序列分析结果表明,扩增片段长度为550bp,编码159个氨基酸。主要由Gly(甘氨酸)、Glu(谷氨酸)、His(组氨酸)、Lys(赖氨酸)这4种氨基酸组成,占总量的70%。含1个重复了5次的10肽基序,其序列为Lys-Gly-Glu-Gln-His-Gly-His(Phe)-Val(Leu)-Gly-Gly。经序列比较分析,该片段与紫花苜蓿冷诱导基因CAS15B的核苷酸、氨基酸的同源性均为90%,命名为MfCAS15-1。亚细胞结构定位分析结果显示,MfCAS15-1是一种定向到核的蛋白,在调节或维持核的结构与功能方面起作用。本研究在黄花苜蓿中成功获得了抗寒基因同源序列,为最终克隆黄花苜蓿MfCAS15-1抗寒基因全长奠定了基础。

关键词: 黄花苜蓿, 冷诱导基因, 克隆, 序列分析